8. 切片
切片的*步必需粗切。粗切的厚度大約在50~100微米左右,質地較硬的組織或較小的組織應再薄一些,粗切致組織全部暴露后,才進行細切。細切至組織塊表面均勻一致,無白點后,再把切的蠟片放入溫水中。切片時要求用力均勻、柔和,搖速不易過快或過慢。過快會導致切片厚薄不均,機器磨損;過慢會使切片增厚。切片厚度一般為3~5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。
切下的片膜其大小形狀應與組織塊一致,切片的不完整,常會將重要病變遺漏,導致誤診、漏診。在切片放蠟塊時,應注意組織包埋的方向,組織的層次,纖維、肌肉等的走向應與切片刀平行,較難切的部分應放在上面,如皮膚的表皮,腫塊的包膜,胃腸道的漿膜等,這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。ELISA試劑盒
操作切片機時應用力均勻,避免用力過重。對脫鈣組織、骨髓,以及已知的鈣化組織,應選用固定的刀口,以減少其他部位出現(xiàn)缺口的可能性。在使用毛筆展片時要防止筆絲進入刀口,因為每切到一根筆絲,就會增加一個缺口。切片厚度一般為4~6微米,有人認為:只要切片機刻度標著幾個微米,切出來的片子就是幾個微米。其實不然,當切片刀不鋒利,或切片時速度不勻,或切的較慢時,切的片子都會變厚,只有在切片刀十分鋒利、切片勻速的情況下,才能真正保證其厚度。ELISA試劑盒
下面是切片時碰到的問題及可能處理的方法:(1)組織發(fā)脆:一般是脫水、透明、浸蠟時間過長、溫度過高,并與組織本身質地也有關,在切片時,邊切邊用嘴向蠟片吹氣,可能會好些。(2)切片卷起,可能是刀不鋒利,或刀鋒在另一面,或刀角度過大,切片太厚等等。(3)蠟片彎曲:可能是刀鋒不均,切片刀未磨直,切片刀與蠟塊不平行。(4) 透明、浸蠟時間過長、溫度過高,并與組織本身質地也有關(5)厚薄不均:可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊,組織太硬,或切片機主軸太向前,或切片機已磨損。(6)切片出現(xiàn)裂痕:可能是刀有缺口,石蠟內有雜質,組織內有鈣化、骨片或有線結, 也可能會有棉紙纖維等。(7)切片不連片,切不下片,切片很厚,或者切片后蠟塊發(fā)白,內陷:組織脫水不佳。補救辦法:可先將蠟塊溶解,取出組織,放入加熱水浴的丙酮內(80℃),30~
60分鐘,再進行透明浸蠟包埋切片,也許會好一點。ELISA試劑盒