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普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)收集血樣

點擊次數:1095 更新時間:2021-10-27
 

普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)準備試劑與收集血樣:

雙重核酸試劑盒(熒光PCR法) 1.  收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復凍融。

2.  標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。

4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

檢測程序:

1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板:同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

性能:

1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

2. 靈敏度:檢測濃度小于0.1 U/mL。

3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6個月

黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI

人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS

人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)

人腦瘤細胞;SF126

人腦瘤細胞;SF763

人腦瘤細胞;SF767

人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1

人腎上腺皮質癌細胞;SW-13

人結直腸癌細胞;T84

人急性單核細胞白血病細胞;THP-1

人神經膠質細胞瘤細胞;U251

人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937]

人胃腺癌細胞;BGC-823

人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]

人喉癌上皮細胞;Hep-2

人纖維肉瘤細胞;HT-1080

人絨癌細胞;JEG-3

人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16

白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2

TNFa轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa

人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1

人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17

人乳腺癌細胞;MDA-MB-157

人成骨肉瘤細胞;MG-63

人小細胞肺癌細胞;NCI-H446

人多發性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]

人腦瘤細胞;SF17


 
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