人ELISA試劑盒使用注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡半個小時分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標木數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
人ELISA試劑盒的實驗操作步驟：
1.標準品的稀釋：在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣，待測樣品孔中先加樣品稀釋液，然后再加待測樣品。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置室溫溫育半個小時左右。
4.配液：將濃縮洗滌液用蒸鐳水稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置后棄去，如此重復幾次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑，空白孔除外。
7.再按照上述步驟進行一次溫育和洗滌。
8.顯色：每孔先加入顯色劑，輕輕震蕩混勻，室溫避光顯色十五分鐘。
9.終止：每孔加終止液，終止反應。
10.測定：以空白空調零，依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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