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腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒反應五要素

點擊次數:632 更新時間:2022-03-29
 

腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 

人調節正常T細胞表達和分泌因子(RANTES)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 

人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit

人嗜酸粒細胞趨化因子(ECF/CCL11)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit

人胸腺激活調節趨化因子(TARC)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit

人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit 

人二級淋巴組織趨化因子(SLC)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human SLC (Secondary Lymphoid Tissue Chemokine) ELISA Kit

人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MDC (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit

人髓樣前體細胞抑制因子2(MPIF2)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit

人巨噬細胞炎性蛋白4α(MIP4α)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MIP4α (Macrophage Inflammatory Protein 4 Alpha) ELISA Kit

人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human CTACK (Cutaneous T-cell Attracting Chemokine) ELISA Kit

人可溶性CD14分子(sCD14)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA Kit

人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FcεRII/CD23 (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit


 
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