PCR-熒光探針法是一種在PCR反應中利用特定熒光探針實現等量擴增和實時檢測的方法,其具有以下特點:
1、高靈敏度:可以檢測到非常低濃度的靶分子,其靈敏度可以達到單個分子的水平,對樣本的檢測結果也非常準確。
2、高特異性:熒光探針的設計可以使其只與目標DNA序列的特定區域結合,并且將靶標和非靶標分子之間的差異擴大,從而減少假陽性率。
3、實時檢測:熒光探針法的實時檢測方式可以在PCR反應過程中監測擴增產物的積累,有效提高了分析速度和靈敏度。
4、多重檢測:可以同時檢測多個目標序列,從而大大提高了檢測效率和結果的可靠性,并且可以同時檢測不同的細菌菌種等。
5、可定量檢測:熒光信號的強度與產物的數量成正比,可以通過標準曲線法將熒光信號轉換成相應的分子數,實現數量級定量檢測。
6、操作簡便:不需要任何吸光度檢測、凝膠電泳等步驟,只需要添加熒光探針和引物,將反應體系加熱到合適的溫度后,直接進行PCR反應即可。
總之,PCR-熒光探針法的特點是高靈敏度、高特異性、實時檢測、多重檢測、可定量檢測以及操作簡便等,這些優勢使得該方法在分子生物學、臨床診斷、食品安全檢測等領域得到廣泛應用。