黑色素瘤相關抗原H1抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
GPC-3 ELISA Kit磷酸化B-Raf抗體磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒
PLSCR1 ELISA Kit多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體磷脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒
PLD2 ELISA Kit乳腺癌易感基因1抗體磷脂酶D2(PLD2)ELISA試劑盒
PL-A2 ELISA KitBcl-2同源拮抗劑抗體磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒
PI3K ELISA Kitβ3能受體抗體磷脂肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
PGP ELISA Kit腦鈉素/利鈉肽抗體磷酸乙醇酸磷酸酶(PGP)ELISA試劑盒
PCK ELISA KitBZW2蛋白抗體磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒
PGD ELISA Kit緩激肽B1受體抗體磷酸葡萄糖酸脫氫酶(PGD)ELISA試劑盒
PGM ELISA Kit鈣激活鉀通道蛋白α1抗體磷酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒
CIP2A ELISA Kit卵黃狀黃斑病蛋白2抗體磷酸酶PP2A癌性抑制物(CIP2A)ELISA試劑盒
PI3K ELISA Kit鼻咽癌相關轉錄調節蛋白抗體磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
pAMPK ELISA Kitβ葡萄糖醛酸苷酶抗體磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒
AMPK ELISA Kit乳腺癌相關蛋白1抗體磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
pERK ELISA KitBcl2樣凋亡蛋白9抗體磷酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA試劑盒
pGSK3B ELISA KitBTB/POZ結構域蛋白10抗體磷酸化糖原合酶激酶3β(pGSK3B)ELISA試劑盒
pGSK-3 ELISA KitBTB/POZ結構域蛋白17抗體磷酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)ELISA試劑盒
PMLC ELISA KitBTB/POZ結構域蛋白19抗體磷酸化肌球蛋白輕鏈(PMLC)ELISA試劑盒
pIKBα ELISA KitBXDC2蛋白抗體磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒