膽紅素是體內(nèi)衰老的紅細(xì)胞經(jīng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的破壞和肝臟轉(zhuǎn)化的代謝產(chǎn)物,其含量的變化對(duì)疾病的診斷具有重要意義。總膽紅素的檢測(cè)方法常用的有重氮試劑法、膽紅素氧化酶法以及直接分光光度計(jì)法。作者采用二氯苯重氮鹽法(DPD法)的兩種試劑盒以及Roche Modular P和Bayer RA-1000型生化分析儀,檢測(cè)血清和血漿總膽紅素(TBil),結(jié)果報(bào)告如下。
1、材料與方法
1.1 標(biāo)本采集 選擇98例來(lái)我院的體檢者,隨機(jī)分成兩組每組49例。按常規(guī)方法抽取靜脈血4 ml,注入普通干燥管中2 ml置37℃水浴30 min后離心分離血清。另外2 ml注入肝素鈉抗凝管中(每ml血中肝素鈉含量為25 U),混勻后立即分離血漿。
1.2 檢測(cè)方法
1)采用Roche Modular P生化分析儀和Roche公司提供的DPD法總膽紅素檢測(cè)試劑盒,雙試劑、雙波長(zhǎng)(546 nm,600 nm),并采用Roche cfs和Precinorn-u質(zhì)控物進(jìn)行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控。對(duì)49例被檢測(cè)者的血清和血漿TBil進(jìn)行檢測(cè)。
2)同時(shí)應(yīng)用Bayer RA-1000型生化分析儀和中生北控生物科技股份有限公司的DPD法TBil檢測(cè)試劑盒。雙試劑臨用前配成工作液,檢測(cè)波長(zhǎng)為550 nm,并同時(shí)用該公司的質(zhì)控品做室內(nèi)質(zhì)控。
1.3 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS 10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)和配對(duì)資料的χ2檢驗(yàn)。
2、結(jié)果
采用Roche和中生試劑在Roche Modular P和Bayer RA-1000生化分析儀,檢測(cè)血清和血漿TBil結(jié)果(表1)。
結(jié)果表明,采用Roche原裝試劑和生化分析儀所檢測(cè)的血清和血漿TBil無(wú)顯著性差異(P>0.05);使用中生試劑和Bayer RA-1000型生化分析儀檢測(cè)的血漿TBil明顯高于血清TBil,差異有非常顯著性(P<0.01)。
3、討論
TBil的檢測(cè)方法常用的有重氮試劑法、膽紅素氧化酶法和直接分光光度計(jì)法。重氮試劑法中又有改良J-G法、二氯苯重氮鹽(DPD)法和二甲亞楓法等多種方法。作者采用DPD法檢測(cè)原理,由Roche公司的原裝試劑盒和生化分析儀雙波長(zhǎng)(546 nm,600 nm)檢測(cè)血清和血漿TBil,結(jié)果無(wú)顯著性差異(P>0.05),而采用中生試劑公司的試劑盒在Bayer RA-1000型生化分析儀單一波長(zhǎng)(550 nm)檢測(cè)的血漿TBil明顯高于血清TBil,結(jié)果有非常顯著差異(P<0.01)。結(jié)果表明不同儀器和不同的試劑盒檢測(cè)血漿和血清TBil其結(jié)果是有差異的。這與李美珠[1]等人應(yīng)用奧林巴斯AU5400生化分析儀以及和光純藥工業(yè)檢驗(yàn)地帶網(wǎng)株式會(huì)社提供的釩酸鹽氧化法檢測(cè)血漿TBil 14.90 μmol/L,血清TBil 14.27 μmol/L(t=1.93);以及陰斌霞[2]等應(yīng)用日立7170A生化分析儀、日本*化學(xué)株式會(huì)社提供的試劑盒檢測(cè)血漿TBil 11.58 μmol/L、血清TBil 9.06 μmol/L(t=2.084);閃金忠[3]等所檢測(cè)的血漿TBil 19.2 μmol/L、血清TBil 18.8 μmol/L(t=1.08)是有所差別的。作者認(rèn)為其差別可能與不同檢測(cè)方法、不同試劑盒和不同儀器等多因素的方法不同有關(guān)。WHO于2002年發(fā)表的專題報(bào)告中推薦在56項(xiàng)臨床檢測(cè)項(xiàng)目中使用血漿[4],不僅可以提高檢驗(yàn)速度,還可以避免細(xì)胞內(nèi)成分的釋出后對(duì)結(jié)果的影響。作者應(yīng)用Roche試劑和儀器檢測(cè)血漿和血清TBil其結(jié)果未見(jiàn)顯著性差異,建議為了準(zhǔn)確檢測(cè)血漿TBil,應(yīng)采用更穩(wěn)定且不易受諸因素干擾的試劑盒和高精度的生化分析儀。