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什么是限制性內切酶

點擊次數:1243 更新時間:2011-04-25
 

在生物體內有一類酶,它們能將外來的DNA切斷,即能夠限制異源DNA的侵入并使之失去活力,但對自己的DNA卻無損害作用,這樣可以保護細胞原有的遺傳信息。由于這種切割作用是在DNA分子內部進行的,故名限制性內切酶(簡稱限制酶)。限制酶是基因工程中所用的重要切割工具??茖W家已從原核生物中分離出了許多種限制酶,并且已經商品化,在基因工程中廣泛使用。根據限制酶切割的特點,可將它們分為兩大類:一類是切割部位無特異性的;另一類是可特異性地識別核苷酸序列,即只能在一定的DNA序列上進行切割。這種能被特異性識別的切割部位都具有回文序列,也就是在切割部位,一條鏈正向讀的堿基順序與另一條鏈反向讀的順序*一致,如圖3?8所示DNA的堿基順序。在基因工程中使用的多數是后一類酶。限制酶在特定切割部位進行切割時,按照切割的方式,又可以分為錯位切和平切兩種。錯位切一般是在兩條鏈的不同部位切割,中間相隔幾個核苷酸,切下后的兩端形成一種回文式的單鏈末端,這個末端能與具有互補堿基的目的基因的DNA片段連結,故稱為黏性末端。這種酶在基因工程中應用zui多。另一種是在兩條鏈的特定序列的相同部位切割,形成一個無黏性末端的平口。

 

 
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