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肝素鈉工藝流程 |
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點(diǎn)擊次數(shù):4251 更新時(shí)間:2011-09-22 |
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1、鹽解:將刮好的新鮮腸粘膜,每 100 斤腸粘膜加入清水 100 斤,按腸粘膜和水的總重量,加入 4%的 工業(yè)鹽,攪拌均勻,再加燒堿液調(diào) PH 值為 8--9,緩慢升溫 50--55 度,加溫時(shí)每 10--20 分鐘加水?dāng)嚢枰淮危銣?2 小時(shí),注意要間隔攪拌。恒溫結(jié)束后,要快速升溫到 96--98 度,恒溫 10 分鐘,趁熱撈出 上層的渣子。用 100 目尼龍布過濾。 注意加鹽過多會(huì)使下一步交換吸附含量超過規(guī)定,加鹽過少,肝素和蛋白質(zhì)分離不*,堿性過強(qiáng),會(huì)使肝素 降解破壞,收率下降。同時(shí)還能使一些蛋白質(zhì)溶解度增大,造成過濾困難。堿性不足造成提取液偏酸,則 在高溫的情況下,肝素迅速破壞,升溫過急會(huì)使蛋白質(zhì)早凝固,影響肝素的分解和溶出。 2、吸附:待提取液溫度冷至 50--55 度,應(yīng)檢測(cè)鹽濃度為 3。5--5%時(shí),即可加入 5%已處理號(hào)的樹脂。 如樹脂上含有鹽水,需用清水將樹脂洗凈控干,方可使用。攪拌吸附 6--8 小時(shí),轉(zhuǎn)速 60--80 轉(zhuǎn)/分鐘為 宜,攪拌須使樹脂上下翻動(dòng),否則吸附效果差,收率低。吸附完畢,棄去上層吸附液,然后用 100 目的尼 龍布過濾出樹脂。 加入提取液的樹脂量: 新樹脂可按提取液的 5--6%加入, 舊樹脂可按提取液的 8--10%。 3、洗滌:過濾后的樹脂用 40 度左右的溫水,漂洗干凈。再放入與樹脂重量相等的鹽溶液中(鹽溶液的濃 度為 5%左右)洗滌 10--20 分鐘,除去低分子肝素和一些蛋白質(zhì),然后將樹脂過濾。 4、洗脫:*次洗脫將過濾號(hào)的樹脂放入濃度為 20--22%的鹽溶液中攪拌洗脫 5--6 小時(shí),樹脂和鹽水 的比例為 1:0。7。過濾后將樹脂控干進(jìn)行第二次洗脫,調(diào)鹽溶液濃度為 16--18%,攪拌 3 小時(shí)以上, 樹脂和鹽水的比例與*次相同,過濾后的水即是藥液。 5、除雜:將稀堿水加入洗脫后的藥液里,要快攪慢加,調(diào) PH 值為 10--12 攪拌 2 分鐘,靜止沉淀 20 小 時(shí)后,抽出上層藥液,下沉的是雜質(zhì),且渣子放另外桶內(nèi)過濾。過濾后的藥液和下次藥液除雜時(shí)合并待用。 6、沉淀:將抽出除雜 后的藥液加入鹽酸調(diào) PH 值為 7--7。5,即可加入酒精進(jìn)行沉淀。向藥液里加入酒精 要快攪慢加。(由于酒精的濃度不同,因此沉淀肝素的酒精用量不等)用酒精計(jì)測(cè)量酒精度為 30--35%, 加蓋密封,沉淀 20 小時(shí)。棄去廢酒精收集糊狀肝素。注意在抽出廢酒精時(shí),不可抽動(dòng)沉淀的肝素。將多 次的肝素鈉漿收集在一起,以備集中脫水干燥。 7、脫水:將的肝素鈉漿,用雙層的確良布過濾后放入 95%的酒精內(nèi)浸泡 20 小時(shí),加蓋密封。過濾 后按上述方法重復(fù)一次,使其充分的將肝素上的水分交換下來(lái)。 8、干燥:待肝素鈉漿瀝干后,放在不銹鋼盤中烘干,用鏟子來(lái)回的翻動(dòng),溫度保持在 50--55 度,注意溫 度低于要求是不易烘干的,溫度高于 60 度時(shí)會(huì)使肝素鈉的生物活性下降。干燥后的肝素很易吸潮,應(yīng)及 時(shí)用雙層塑料袋密封包裝,于通風(fēng)干燥處存放。 |
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