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細(xì)胞培養(yǎng)中使用血清的缺點(diǎn)以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) |
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點(diǎn)擊次數(shù):1036 更新時(shí)間:2011-11-05 |
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細(xì)胞培養(yǎng)中使用血清的缺點(diǎn): 血清成分復(fù)雜,雖含許多對(duì)細(xì)胞有利成分,也含有對(duì)細(xì)胞有害的成分,使血清有幾個(gè)明顯的缺點(diǎn): 1、對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(表皮細(xì)胞)。 2、血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等都會(huì)影響細(xì)胞生長,甚至造成細(xì)胞死亡。 3、取材中可能帶入支原體、病毒,對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響,可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。 4、動(dòng)物個(gè)體不同,血清產(chǎn)地、批號(hào)不同,每批質(zhì)量差異甚大,其成分不能保持一致。 5、血清的使用使得實(shí)驗(yàn)和的標(biāo)準(zhǔn)化困難,其中的蛋白質(zhì)使得某些轉(zhuǎn)基因蛋白生物藥品中分離純化工作很難完成。 6、大規(guī)模中,血清來源越來越困難,價(jià)格昂貴,是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)成本的主要部分之一。 血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): 血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對(duì)象,二是取材過程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無病并且在的出生天數(shù)之內(nèi),取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生物制品規(guī)程》中的要求: 1、牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。 2、有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。 3、證明所用牛血清中不含對(duì)所疫苗病毒的抑制物。 4、血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。 5、無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細(xì)菌噬菌體污染。 6、對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。 血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): 血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對(duì)象,二是取材過程。用于取材的動(dòng)物應(yīng)健康無病并且在的出生天數(shù)之內(nèi),取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生物制品規(guī)程》中的要求: 1、牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。 2、有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。 3、證明所用牛血清中不含對(duì)所疫苗病毒的抑制物。 4、血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。 5、無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細(xì)菌噬菌體污染。 6、對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。 |
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