微生物菌種的培養(yǎng): ⒈ 孢子制備 ⑴ 孢子的制備 一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。 ⑵ 霉菌孢子的制備 霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。 ⒉ 種子制備 ⑴ 搖瓶種子制備 搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。 產(chǎn)品名稱:小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 貨號:YS-01J12933 拉丁文: Yersinia enterocolitica 提供形式: 凍干管,斜面培養(yǎng)物 安全等級: 2 模式菌株: no 培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌價格 | Yersinia enterocolitica | YS-01J12933 |
公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明: 1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。 2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。 3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長 4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。 5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。 保存方法: 傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。 液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。 懸液保存法: ① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。 ② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。 載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。 常用的冷凍保存法: ① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。 ② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。 ③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。 微生物培養(yǎng)方法: 1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。 2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。 上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟: a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。 b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。 c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。 Rabbit Anti-Avidin/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗親和素原鈣粘蛋白γA3抗體 Rabbit Anti-Avidin/APC APC標(biāo)記的兔抗親和素血小板源性生長因子BB抗體 Rabbit Anti-Avidin/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗親和素胰島素促進因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白) Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗親和素乙?;疨53(Lys382)抗體 Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗親和素磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗親和素磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗親和素腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體 Rabbit anti-Avidin whole serum 兔抗親和素抗血清關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體 Rabbit Anti-Avidin 兔抗親和素血小板活化因子抗體 RAB9 ras癌基因家族Rab9蛋白抗體蛋白酶激活受體-1抗體 RAB8B ras癌基因家族RAB8B抗體蛋白酶激活受體-2抗體 RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c MEL)蛋白酶活化受體4抗體 RAB7 RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB7抗體多腺苷二磷酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1 RAB6C RAS癌基因相關(guān)蛋白Rab6C抗體配對盒基因3抗體 RAB6B RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB6B抗體配對盒基因8抗體 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌價格大腸埃希氏桿菌FAM129B蛋白抗體 5-HIAA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,進分 蟻巢傘屬微管動力調(diào)節(jié)蛋白2抗體 Cefodizime acid 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 秦氏蜜環(huán)菌FAM50A蛋白抗體 3,4-Dimethoxycinnamic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 紅緣擬層孔菌FAM113A蛋白抗體 Cefodizime sodium 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR FAM150A蛋白抗體 Cefdinir 質(zhì)量規(guī)格:>92%,BR 聚生殼菌FRMD8蛋白抗體 Boc-D-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 葡萄座腔菌FGFR1癌基因伴侶蛋白抗體 Gibberllin A4+7 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 多鏈霉菌FAM家族蛋白40A抗體 CH5424802 質(zhì)量規(guī)格:>98%,ALK抑制劑
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