特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途! 產品名稱 | 地衣形芽孢桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Bacillus licheniformis | 貨號 | YSP96417 |
熒光染料的優點: 產品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產物結合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產物會影響結果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。 正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。 當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發出熒光。檢測到的熒光分子數與PCR產物的數量成正比,因此,根據PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數量。 TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術的優點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術的缺點: 成本高; 設計難度大; 只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態性以及根據SNP區別和定量菌株。 PCR技術的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據終的PCR產物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 鹽酸法舒地爾(標準品)HES1 (D6P2U) Rabbit mAb5-氨基嘧啶 酚-O-β-D-槐糖苷;酚-O-槐糖苷Phospho-p90RSK (Ser380) (D3H11) Rabbit mAb氨基-2-羥基吡啶 草質素苷(標準品)nsin 2 Antibody氯噻吩-2-羧酸 紅景天素;草質素甙;Calumenin (4C6) Mouse mAb1-BOC-吡咯烷-甲酸 地達諾辛;去羥肌苷Phospho-MARCKS (Ser159/163) (D13D2) Rabbit mAb吡咯烷-甲酸 羊藿次苷IPhospho-KIF1B (Ser1487) Antibody2-甲基-甲酸甲酯 寶藿苷II;大花羊藿苷A;意卡瑞苷A(標準品)Phospho-DDR1 (Tyr792) AntibodyBOC-DL-脯氨酸 槐屬苷(標準品)SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb乙基磺酰氯 槐屬苷SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb2-氨基-3,5-二溴-6-甲基吡啶 甲基麥冬二氫高異黃酮A,甲基麥冬黃烷酮APathScan® Total Smad2/3 Sandwich ELISA KitN-乙基-N-羥乙基間甲 甲基麥冬黃烷酮BPathScan® Phospho-Smad2 (Ser465/467)/Smad3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit6-甲基 7,2'-二羥基-3′,4′-二甲氧基異黃烷PathScan® Total Smad3 Sandwich ELISA Kit丁二酸二異酯 6aR,11aR)羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷PathScan® Phospho-Smad3 (Ser423/425) Sandwich ELISA KitN-基嗎啉 千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷PhosphoPlus® IGF-I Receptor β Antibody DuetN-基哌 泮托拉唑鈉1.5水合物Phospho-REPS1 (Ser709) (D8C1) Rabbit mAb7-氨基庚酸 泮托拉唑鈉1.5水合物(標準品)Glucocorticoid Receptor (D8H2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)基甲酸 (S)-10-羥基喜樹;10-羥基喜樹FoxK2 Antibody硝基-羥氨基酚 10-羥基喜樹(標準品)SSRP1 Antibody一氯環戊烷 地衣形芽孢桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)ELISA試劑盒phospho-CYLD(Ser418) 酸化微管結合蛋白CYLD抗體100 ul Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒CYP1A1 細胞色素P450 1A1抗體100 ul Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)ELISA試劑盒P450 1A2/CYP1A2 細胞色素P450 1A2抗體20 ul Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒CYP11A1/P450SCC 細胞色素P450 11A1抗體100 ul 3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試劑盒CYP2C9 細胞色素P450 2C9抗體100 ul 3-α羥基類固脫氫酶(Akr1c9)ELISA試劑盒CYP3A4 細胞色素P450 3A4抗體100 ul 3-O-甲基多巴(3-OMD)ELISA試劑盒CYP2D6 細胞色素P450 2D6抗體1 Kit Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒CYP19 細胞色素P450 19抗體100 ul Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒CYP8A1/PTGIS 前列環素合成酶抗體100 ul |