特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 黏孢子蟲屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Myxosporidia spp. | 貨號 | YSP96990 |
熒光染料的優(yōu)點(diǎn): 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點(diǎn): 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。 正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn): 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn): 成本高; 設(shè)計(jì)難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴(kuò)增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。 一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 Adracalin 英文名稱: Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體 0.2ml Anti-Aggrecan/FITC 熒光素標(biāo)記軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml PF-4/CXCL4 ELISA Kit 大鼠血小板因子4Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-CD8/RBITC 羅丹明標(biāo)記CD8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh FBXW8/FBXO29 FBXW8蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml (ALCAM)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Activated Thyroxine,FT4 ELISA Kit 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISA Kit 大鼠游離*狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat 低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人白血病BCR-ABL融合基因PCR檢測試劑盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人白細(xì)胞抗原PCR檢測試劑盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人白細(xì)胞分離液1.078Cell Separation Solution-20℃保存200 mL 人β,1-3-半乳糖苷酶基因PCR檢測試劑盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人Nucleostemin基因PCR檢測試劑盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人Her2/neu基因PCR檢測試劑盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人GAPDH基因PCR檢測試劑盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人FGFR3 1138G/A多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP)低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 人E-選擇素S128R基因多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP)低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 異鼠李素Isorhamnetin480-19-320mgHPLC≥98% 異鼠李素-3-O-新橙皮苷Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside55033-90-420mgHPLC≥98% 異土木?Beta-EPR ELISA Kit 大鼠β內(nèi)啡肽受體 96T MLCK 英文名稱: 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 0.1ml C16orf57 英文名稱: 16號染色體開放閱讀框57抗體 0.2ml Anti-NSBP1 核小體結(jié)合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml NAG(Human N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) ELISA Kit 人N-酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-NKG2C NK細(xì)胞受體2C抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh IL-12RB1/CD212 白細(xì)胞介素-12受體β1抗體 規(guī)格 0.1ml Human LDL-IC ELISA Kit 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物 96T Pan Cytokeratin/p-CK 英文名稱: 廣譜細(xì)胞角蛋白PCK抗體 0.1ml 組蛋白H3 (Di Methyl Lys9) 單克隆抗體(3C2)Histone H3 (Di Methyl Lys9) Monoclonal Antibody(3C2)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 組蛋白H3 (Tri Methyl Lys9) 單克隆抗體(4H8)Histone H3 (Tri Methyl Lys9) Monoclonal Antibody(4H8)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 組蛋白H3 (Mono Methyl Lys9) 單克隆抗體(1E8)Histone H3 (Mono Methyl Lys9) Monoclonal Antibody(1E8)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul NFkB p65 單克隆抗體NFkB p65 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 過氧化物還原酶1 單克隆抗體Peroxiredoxin 1 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 甘精胰島素 單克隆抗體Insulin Glargine Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 黏孢子蟲屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒周期素E2抗體Tissue factor/CD142/CF3/F3/FITC 熒光素標(biāo)記組織因子抗體IgG100 ul 酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶CAMK2B/D/G抗體TLR1/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體1抗體IgG20 ul 腫瘤易感候選基因3抗體TLR2/CD282 /FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體2抗體IgG100 ul 酸化腫瘤易感候選基因3抗體TLR3 /FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體3抗體IgG100 ul 酸化CREB-1抗體TLR4/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體4抗體IgG100 ul 酸化CREB-1抗體TLR5/CD285 /FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體5抗體IgG100 ul 酸化周期素依賴性激酶6抗體TLR6/CD286/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體6抗體IgG100 ul 原癌基因CBL2抗體TLR9/CD289/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體9抗體IgG100 ul 酸化原癌基因CBL2抗體TLR11/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體11抗體IgG100 ul |