特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！ 產品名稱 | 馬可尼小囊蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Mikrocytos mackini | 貨號 | YSP96921 |
熒光染料的優點：
產品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發出熒光。檢測到的熒光分子數與PCR產物的數量成正比，因此，根據PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態性以及根據SNP區別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的，隨著反應循環數的增加，終PCR反應不再以指數形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段， PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
ASAP1 英文名稱： 發育分化增強因子1抗體 0.1ml Anti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠酸化腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml SHBG(Mouse sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 小鼠性激素結合球蛋白Multi-class antibodies規格： 48T Anti-CD177/FITC 熒光素標記CD177抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的驢抗人IgG 規格 0.1ml RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細胞抗體 96T MHC Class II 英文名稱： 組織相容性復合體2抗體 0.1ml BRCC4 英文名稱： 癌易感基因復合蛋白4抗體 0.2ml Anti-phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 酸化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgMMulti-class antibodies規格： 48T Anti-IRF7 干擾素調節因子7抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml Rhesus antibody Rh LGR4/GPR48 G蛋白偶聯受體48抗體 規格 0.1ml Beta-CG(Human Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺激素β 96T p53BP1 英文名稱： p53結合蛋白1抗體 0.2ml 甘露醇發酵培養基250克Mannitol Ferment Medium腸道桿菌的鑒別，細菌甘露醇發酵試驗 普通肉湯瓊脂平板50塊Nutrient Agar Plate一般細菌的培養和細菌總數的測定 M-H瓊脂平板10塊M-H Agar Plate 沙保弱氏瓊脂平板10塊沙保弱氏瓊脂平板 克氏鐵瓊脂斜面平板10支KIA Plate 弧菌選擇瓊脂平板10塊TCBS Agar Plate
馬可尼小囊蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒細胞粘附分子4抗體ox-LDL/FITC 熒光素標記抗氧化低密度脂蛋白抗體IgG100 ul 鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體OXR /FITC 熒光素標記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgG100 ul 周期素依賴性激酶5激活結合蛋白C53抗體Oxytracycline/FITC 熒光素標記土霉素抗體IgG100 ul 著絲粒蛋白H抗體P2P-R/RBBP6 /FITC 熒光素標記增殖潛能相關蛋白抗體IgG100 ul 半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體P2Y1 receptor/FITC 熒光素標記P2Y1受體抗體IgG100 ul 碳酸酐酶相關蛋白/腦蛋白10抗體P2Y4 receptor/P2ry4 /FITC 熒光素標記P2Y4受體抗體IgG1 Kit 白細胞介素-18受體α鏈抗體P14ARF/FITC 熒光素標記抑癌基因p14抗體IgG1 Kit 轉錄阻抑蛋白CTCF抗體P16/FITC 熒光素標記兔抗抑癌基因p16抗體IgG100 ul T淋巴細胞CD1抗體P19ARF/FITC 熒光素標記p19ARF抑癌基因抗體IgG100 ul |
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