實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 馬克洛菌PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Crossiella equiPCR | 貨號 | HE30863-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。 CBZ-L-天冬氨酸/N-芐氧羰基-L-天冬氨酸/苯甲氧羰基-L-天門冬氨酸/CBZ-L-天門冬氨酸/Z-L-aspartic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR 包裝;250mg CBZ-D-天冬氨酸/N-芐氧羰基-D-天冬氨酸/N-CBZ-D-天門冬氨酸/N-芐氧羰基-D-天門冬氨酸/N-Cbz-D-aspartic Acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g CBZ-L-精氨酸/N-芐氧羰基-L-精氨酸/CBZ-L-Arg 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;1g CBZ-DL-苯丙氨酸/N-芐氧羰基-DL-苯基丙氨酸/N-芐氧羰基-DL-苯丙氨酸/Z-DL-phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg CBZ-硫苯基-L-半胱氨酸/N-芐氧羰基-S-苯基-L-半胱氨酸/CBZ-S-苯基-L-半胱氨酸/N-Z-S-phenyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g CBZ-甘氨酸/芐氧羰基甘氨酸/N-羧甲基氨基甲酸芐酯/N-芐氧羰基-甘氨酸/CBZ-L-Gly 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25ml CBZ-L-羥脯氨酸/N-芐氧羰基-L-羥脯氨酸/N-Cbz-Hydroxy-L-proline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25ml CBZ-L-脯氨酸/N-芐氧羰基-L-脯氨酸/N-羰芐氧基-L-嘌呤/N-CBZ-L-Proline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100mg CBZ-D-脯氨酸/N-芐氧羰基-D-脯氨酸/Z-D-Pro-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,丹參提取 包裝;25mg CBZ-L-異亮氨酸/N-芐氧羰基-L-異亮氨酸/N-羰酰芐氧基-L-異亮氨酸/Z-L-Isoleucine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g CBZ-L-亮氨酸/N-羧基-L-亮氨酸/N-芐氧羰基-L-亮氨酸/Z-Leu-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g CBZ-D-亮氨酸/N-芐氧羰基-D-亮胺酸/N-芐氧羰基-D-亮氨酸/Z-D-Leu-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,BR 包裝;1g CBZ-D-苯丙氨醇/N-芐氧羰基-D-苯丙氨醇/N-芐氧基羰基-D-苯基丙氨醇/N-芐氧羰基-D胺醇/Z-D-Phenylalaninol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g CBZ-L-絲氨酸/N-芐氧羰基-L-絲氨酸/N-甲酸苯甲酸酯-絲胺酸/N-羰酰芐氧基-L-絲氨酸/Z-Ser-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g CBZ-L-色氨酸/N-芐氧羰基-L-色氨酸/CBZ-L-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,HPLC≥95% 包裝;25g CBZ-D-色氨酸/N-芐氧羰基-D-色氨酸/CBZ-D-Trp 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g FMOC-D-丙氨酸/N-芴甲氧羰?;?D-丙氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-D-丙氨酸/Fmoc-D-Ala-OH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 馬克洛菌PCR檢測試劑盒Lactobacillus│sakei subsp. sakei 中文名稱:清酒乳桿菌種屬:Lactobacillus│sakei subsp. sakei提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:6生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99% Leuconostoc│pseudomesenteroides 中文名稱:假腸膜明串珠菌種屬:Leuconostoc│pseudomesenteroides提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:26℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:95% Stenotrophomonas nitritireducens 中文名稱:還原亞硝酸鹽寡養(yǎng)單胞菌種屬:Stenotrophomonas nitritireducens分離基物:laboratory scale biofilter提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Denitrification, N2O production培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:NB生長條件:30℃,好氧24-48h,鏡檢為陰性桿菌,純存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:95% Cupriavidus│basilensis 中文名稱:貪銅菌種屬:Cupriavidus│basilensis分離基物:laboratory fixed-bed reactor提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:Utilizes benzene, chlorobenzene, 2,4-dichlorophenol, 2,6-dichlorophenol, phenol, toluene培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:96% Paracoccus│pantotrophus 中文名稱:全食副球菌種屬:Paracoccus│pantotrophus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Produces ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase (1755). Chemolithotrophic growth with hydrogen (160). Preservation (3363, 4265). Utilizes thiosulfate (1623). Removal of nitrate (4345).培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98% Lysobacter enzymogenes subsp. enzymogenes 中文名稱:產(chǎn)酶溶桿菌產(chǎn)酶亞種種屬:Lysobacter enzymogenes subsp. enzymogenes分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:95% Azospirillum│lipoferum 中文名稱:生脂固氮螺菌種屬:Azospirillum│lipoferum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:448生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:95% Lactobacillus│bulgaricus 中文名稱:保加利亞乳桿菌種屬:Lactobacillus│bulgaricus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制作酸奶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:6生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:95% |