產品名稱:前病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱:HIV2 Provirus HIV2PCR 編號:HE31091-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 ? 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 乳糖肉湯培養基/Lactose Broth Medium 包裝;25g 煌綠乳糖膽鹽肉湯/BGLB肉湯/煌綠乳糖膽鹽增菌液/BGLB Broth 包裝;5g 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎/TSP肉湯基礎/Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 包裝;1g 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培養基/BCP Glucase Peptone Water Medium 包裝;5g 溴甲酚紫葡萄糖肉湯/BCP Glucose Broth 包裝;100g 胰蛋白胨大豆肉湯/胰酪胨大豆肉湯/胰酶大豆肉湯/CASO 肉湯/TSB 包裝;25g 胰酪胨大豆瓊脂/胰酶大豆瓊脂/胰蛋白胨大豆瓊脂/TSA 包裝;500g 胰胨大豆瓊脂斜面/TSA/Tryptic Soy Agar 包裝;1G 堿性蛋白胨/AP 包裝;1g 孟加拉紅瓊脂/孟加拉紅培養基/虎紅瓊脂/Rose Bengal Agar 包裝;25g 酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂/YGC瓊脂/YGC Agar 包裝;5g Candida Elective 瓊脂/BiGGY瓊脂/坎迪達尼克森選擇性瓊脂/鉍甘氨酸葡萄糖酵母瓊脂/BiGGY Agar 包裝;1g DTM培養基/DTM Medium 包裝;250mg DRBC瓊脂/氯硝胺孟加拉紅瓊脂/氯硝胺虎紅瓊脂/氯硝胺玫瑰紅瓊脂/DRBC Agar 包裝;5g WORT瓊脂/WORT Agar 包裝;1g WORT肉湯/WORT Broth 包裝;250mg 改良綠色酵母菌和真菌肉湯 包裝;25g 前病毒PCR檢測試劑盒Saccharomyces sp. 中文名稱:酵母菌種屬:Saccharomyces sp.提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:YM 培養基::酵母提取物,3.0 g 麥芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白棟,5.0 g 瓊脂,20.0 g 蒸餾1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Streptomyces│griseolus 中文名稱:淺灰鏈霉菌種屬:Streptomyces│griseolus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Gomphidius│viscidus 中文名稱:鉚釘菇種屬:Gomphidius│viscidus分離基物:子實體提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用真菌培養方法培養基:17生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Ralstonia eutropha 中文名稱:富養羅爾斯通氏菌種屬:Ralstonia eutropha提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:營養肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Sphingobacterium multivorum 中文名稱:多食鞘氨醇桿菌種屬:Sphingobacterium multivorum分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:LB培養基::酵母提取物 5.0 g 蛋白胨 10.0 g NaCl 10.0 g 瓊脂 15.0 g 蒸餾 1.0 L pH 7.0生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Agrobacterium│tumefaciens 中文名稱:根癌土壤桿菌種屬:Agrobacterium│tumefaciens提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:植物轉基因研究培養方法培養基:12生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:99% Bacillus│litoralis 中文名稱:岸濱芽孢桿菌種屬:Bacillus│litoralis分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:分類;研究;教學培養方法培養基:832生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99% Brevundimonas│vesicularis 中文名稱:泡囊短波單胞菌種屬:Brevundimonas│vesicularis分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:820生長條件:29℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99% |