實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

氟 Standard for GC ,≥99.6% (GC)小鼠抑制素A(INH-A)免疫試劑盒水通道蛋白-2抗體TrK A/NTRK1  酪氨激酶A抗體

氟 CP小鼠抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒血管緊張素原抗體Trk A/B/C  酪氨激酶A/B/C抗體

氟 分析標準品小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)免疫試劑盒雄激素受體抗體TRIP1/PSMC5  狀腺受體相互作用蛋白1抗體

己丁酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒死亡調節蛋白抗體(凋亡、半胱蛋白酶激活抑制劑)TRIP  腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體

己丁酯 ≥98%小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒軸蛋白1抗體Triosephosphate isomerase  糖異構酶抗體

丁位十二內酯 98%小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)免疫試劑盒自噬相關蛋白9B抗體TRIM7/RNF90  糖原生成素相互作用蛋白抗體

丁乙酯 99%小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)免疫試劑盒自噬相關蛋白12抗體TRIM6/RNF89  環指蛋白89

異戊 98%小鼠乙酰輔酶A 免疫試劑盒自噬相關蛋白13抗體TRIM5α/RNF88  環指蛋白88抗體

異戊 Standard for GC,>99%(GC)小鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)免疫試劑盒自噬相關蛋白3抗體TRIM50  TRIM50蛋白抗體

異戊 ≥97%，Kosher小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)免疫試劑盒整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體TRIM47  星形瘤高表達蛋白抗體（環指蛋白100）

異丁異丁酯 98%小鼠乙酰膽堿(ACH)免疫試劑盒化活化復制因子2抗體TRIM41  環指蛋白調節蛋白激酶C蛋白抗體

己異丁酯 98%小鼠胰脂肪酶(PL)免疫試劑盒化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體TRIM36/RNF98  環指蛋白98抗體

丁酯 99%小鼠胰激肽原酶(PK)免疫試劑盒絲氨/蘇氨蛋白激酶ATR抗體TRIM35  TRIM35蛋白抗體

異丁酯 99%小鼠胰高血糖素樣肽2(GLP-2)免疫試劑盒去整合素樣金屬蛋白酶18抗體TRIM32  TRIM32抗體

異丁酯 ≥99%,Kosher小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)免疫試劑盒活化轉錄因子6抗體TRIM31  環指蛋白HCG1抗體
抗壞血酸（AsA）含量微管蛋白β3抗體(1S)-菊內酯 CHRYSANTHEMOLACTONE, (1S)-(RG)Human, Mouse, Rat

腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體(1R)-野菊花 CHRYSANTHEMOLACTONE, (1R)-(RG)Human, Mouse, Rat

內質網蛋白44抗體化膽 CHOLINE CHLORIDE(RG)Human, Mouse, Rat

上調因4抗體（C端）吡啶鉻 CHROMIUM(III)PICOLINATE(SH)Human, Mouse

尿皮質素UCN3抗體CHRYSANTHELLIN B(SH)Human, Mouse, Rat

尿調節蛋白抗體CHRYSANTHELLIN A(SH)Human, Mouse, Rat

泛素融合降解樣蛋白1抗體CHRYSANTHELLIN A(SH)Human

泛素特異性蛋白酶9X抗體4-二氫色原 CHROMANONE, 4-(RG)Human, Mouse

去泛素酶10抗體4-二氫色原 CHROMANONE, 4-(RG)Human, Mouse

叉頭蛋白I1抗體phospho-IkB beta (Ser23)/FITC  熒光素標記化KB抑制蛋白β抗體IgG

化叉頭蛋白4抗體IL-1 Alpha /FITC  熒光素標記白介素1α抗體IgG