熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
脂筏特征蛋白1(FLOT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　玉米黑粉菌　1g

矢車菊苷β1(CENTβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　釀酒酵母　5g

矢車菊苷β2(CENTβ2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　鐮刀菌屬　25g

矢車菊苷γ1(CENTγ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　枯草芽孢桿菌　1g

矢車菊苷γ2(CENTγ2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　95%　杏鮑菇　250mg

矢車菊苷α2(CENTα2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　靈芝　1g

透明質(zhì)酸合酶3(HAS3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　球芽孢桿菌　5g

海馬鈣蛋白(HPCA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　彎孢菌　25g

神經(jīng)鈣蛋白δ(NCALδ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　解淀粉芽孢桿菌　5g

恢復(fù)蛋白(RCVRN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　灰黃青霉　100g

集鈣蛋白(CASQ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　云南假諾卡氏菌　25g

集鈣蛋白2(CASQ2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　琥珀乳牛肝菌　5g

唾液富組蛋白1(HTN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　細(xì)刺囊殼　100g

連接蛋白2(JPH2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　微小鏈霉菌　25g

連接蛋白3(JPH3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　季也蒙假絲酵母　5g

Intersectin 2蛋白(ITSN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　96%　球毛殼菌（可訂購）　1g

Janus激酶3(JAK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　96%　煙色小菌核鏈霉菌　5g

Janus激酶2(JAK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98+%　孟氏假單胞菌　1g
綿羊痘病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒細(xì)胞外基質(zhì)蛋白2抗體Galectin-3   半糖凝集素-3(抗原)100µl

上皮細(xì)胞膜蛋白3抗體GCS (glucosylceramide synthase, GCS)  葡萄糖神經(jīng)酰合成酶（抗原）100 ul

膜蛋白EVC2抗體GFP (Green Fluorecent proin)  綠色熒光蛋白（多肽抗原）20 ul

哺動(dòng)物室管膜相關(guān)蛋白1抗體EGFP proin/rEGFP/Recombinant EGFP(Enhanced Green Fluorecent proin)  重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白100µl

內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體00  00100 ul

上皮細(xì)胞有絲分裂蛋白抗體GHR (growth hormone receptor)  生長(zhǎng)激素受體(抗原)100 ul

Emerin蛋白抗體GLUT1(Glucose transporr type 1)  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（抗原）100 ul

細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體hypothetical proin (LOC55652)  hypothetical proin 抗原100 ul

酸酶/酸二酯酶家族成員5抗體HCCR-1(BRI3 binding proin)  基因/bri3結(jié)合蛋白(抗原)100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。