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125年1月11日 星期六
 
 
 
 
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乙型肝炎病毒E型探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-30
點擊次數:
929
產品特點:
乙型肝炎病毒E型探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
  50次乙型肝炎病毒E型探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

熒光定量PCR試劑盒技術:
產品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環形凸起,兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

 產品名稱

乙型肝炎病毒E型探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Hepatitis B Virus(HBV)

 貨號

 YSP96796

樣品RNA的抽提:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
依替膦酸二鈉(標準品)HATU2-(7-偶氮并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟酸酯

對氨基磺酸(標準品)三化釕

洛莫司汀(標準品)L-2-氨基丁酸

癸氟奮乃靜(標準品)三氟甲磺酸

鹽酸丁卡因雜質(對丁氨基甲酸)(標準品)1-氟-2-

鹽酸多巴酚丁(標準品)吊白塊 次硫酸氫鈉甲

妥英(標準品)原甲酸*酯

金剛烷(標準品)DL-焦谷氨酸

鹽酸普羅帕酮(標準品)二基次膦酰

鹽酸普羅帕酮化銥

1,對醌(標準品)甲酰基丁酸甲酯

呫噸酸(標準品)對氨基甲酸

呫噸酮(標準品)甲氧基酚

正己酸(標準品)DL-氨酸

甲基丁香酚(標準品)二芐基二硫

香葉(標準品)甲氧基酚

甲(標準品)對二甲

卡維丁(標準品)莫西沙星
乙型肝炎病毒E型探針法熒光PCR檢測試劑盒載脂蛋白E2受體抗體Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC  熒光素標記兔抗Fas相關死亡結構域蛋白抗體IgG100 ul

腺苷A1受體抗體Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC  熒光素標記酸化性成纖維細胞生長因子受體1抗體IgG20 ul

水通道蛋白0抗體P-FADD/FITC  熒光素標記酸化Fas死亡結構域相關蛋白抗體IgG100 ul

轉錄因子AP-2γ抗體FAF1/FITC  熒光素標記Fas相關1因子抗體IgG100 ul

血管生成素相關蛋白5FAK/FITC  熒光素標記粘著斑激酶抗體100 ul

錨蛋白重復域53抗體FAK2/Pyk2/FITC  熒光素標記富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體IgG20 ul

錨蛋白重復域54抗體phospho-Pyk2 (Tyr402)/FITC  熒光素標記酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體IgG100 ul

ATP合成酶β5抗體phospho-Pyk2 (Tyr881) /FITC  熒光素標記酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體IgG100 ul

肌側索硬化癥相關蛋白3抗體FAM3A/FITC  熒光素標記胰腺衍生因子抗體IgG100 ul

 

產品相關關鍵字: 乙型肝炎病毒E型 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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