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乙型肝炎病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-30
點(diǎn)擊次數(shù):
679
產(chǎn)品特點(diǎn):
乙型肝炎病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次乙型肝炎病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

乙型肝炎病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Hepatitis B Virus(HBV)cccDNA

貨號(hào)

 YSP96793

熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
鹽酸貝尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)2,二氟

甲異靛(標(biāo)準(zhǔn)品)1,二溴-5-氟

鹽酸丁螺環(huán)酮(標(biāo)準(zhǔn)品)N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色氨酸

吲哚布芬(標(biāo)準(zhǔn)品)2,5-二甲基-3(2H)-呋喃酮

鹽酸曲普利啶(標(biāo)準(zhǔn)品)2-溴-6-氟吡啶

米力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)5-吲哚酸

壬二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)1-叔丁氧羰基-氨甲基哌啶

培哚普利雜質(zhì)S9780(培哚普利拉)(標(biāo)準(zhǔn)品)(1R,2R)-(-)-N-(對磺酰基)-1,2-二基二

山梨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)2--氨基吡啶

甲磺酸倍他司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)原酸*酯

葡內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)N-甲基-哌啶酮

反鉑黃血鹽

草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)草酸

硝酸奧昔康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)DL-別蘇氨酸

普瑞巴林(標(biāo)準(zhǔn)品)六甲基二硅烷

(S)-(+)-(普瑞巴林雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)2-羥基-5-溴酮

山梨(標(biāo)準(zhǔn)品)2-吡

二(標(biāo)準(zhǔn)品)2-氨基咪唑硫酸鹽
乙型肝炎病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒腺苷酸環(huán)化酶8抗體Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、雌激素受體α抗體IgG100 ul

腺苷酸環(huán)化酶10抗體Phospho-Estrogen Receptor α (Ser104/106) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、雌激素受體α抗體IgG100 ul

腺苷酸環(huán)化酶5抗體ESA/FITC  熒光素標(biāo)記ESA抗體IgG(標(biāo)記抗體)10 ug

腺苷酸環(huán)化酶6抗體E-Selectin/FITC  熒光素標(biāo)記E選擇素抗體IgG100 ul

腺苷酸環(huán)化酶9抗體ET-1/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮素-1抗體IgG1.2mg

肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號(hào)染色體)抗體ET-1/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮素-1抗體IgG250 ug

三酸腺檸檬酸裂解酶抗體ET-1/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)皮素-1抗體IgG100 ul

β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體ET-1/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記內(nèi)皮素-1單克隆抗體IgG100 ul

內(nèi)收蛋白a1抗體ETK/BMX/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體IgG100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 乙型肝炎病毒 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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