熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
1-甲基咪唑(>98%,BR)LIMD1 Antibody(R)-2-氧代四-基氨酸芐酯

1-乙基咪唑(>98%,BR)T7-Tag (D9E1X) XP® Rabbit mAb2-甲氧基-N-

1-萘乙(>98%,BR)T7-Tag (D9E1X) XP® Rabbit mAb2-溴吡啶-酸

乙酸-1-萘酯(>98%,BR)Phospho-CDC37 (Ser13) (D8P8F) Rabbit mAb2,3,5-三氯-吡啶甲

二十八烷(>98%,BR)GPNMB (E1Y7J) Rabbit mAb3,二氟酸

1-基-5-巰基四氮唑(>98.5%,BR)SignalSilence® MUC1 siRNA I2--5-氯吡啶

新戊二(>98%,BR)Claudin-1 (D5H1D) XP® Rabbit mAb阿德福韋

2,2-二甲基琥珀酸(>99%,BR)Claudin-1 (D5H1D) XP® Rabbit mAb2--氟

2,4,5-*氧基甲(>99%,BR)CtBP2 Antibody2--三氟甲酸

三溴酚(>98%,BR)Estrogen Receptor α (D6R2W) Rabbit mAb芐基縮水甘油

2,4,6-三(二甲氨基)酚(>95%,BC)SignalSilence® GRB2 siRNA IO-(2,4,6-三磺酰基)乙酰羥肟酸乙酯

2,二甲基(>98%,BR)PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)氯-1,3,4,5-四氫-2H-1-并氮雜卓-2-酮

2,二甲(BR)PSMB6 (E1K9O) Rabbit mAb氯-甲基吡啶

2,7-二羥基萘(>98%,BR)ATPIF1 (D6P1Q) XP® Rabbit mAb氨基-5-溴-2-甲氧基吡啶

2, 6-二氯醌-氯亞(>98%,BR)BAP1 (D7W7O) Rabbit mAb辛硫

2-金剛烷(>99%,BR)Atg13 (D4P1K) Rabbit mAb2-氟-6-氨基嘌呤

2-金剛烷酮(>99%,BR)PathScan® Total Ezh2 Sandwich ELISA Kit3,5-二氯肼鹽酸鹽

2-氨基-氯甲酸(>98%,BR)Phospho-Merlin (Ser518) (D5A4I) Rabbit mAb2,二氯-6,7-二氫噻吩[3,2-D]嘧啶
疏螺旋體通用探針法熒光PCR檢測試劑盒漢坦病毒(HV)抗體(IgM)ELISA試劑盒CXCR3/CD183  細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體400 ul

含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒CXCR3/CD183  細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體100 ul

含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)ELISA試劑盒CXCR5/CD185  細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體300 ul

含SET域4(setd4)ELISA試劑盒Gastrin  胃泌素抗體10 mg

含patatin樣脂酶域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)ELISA試劑盒Gastrin  胃泌素/蛙皮素抗體100 ul

過氧化脂質(zhì)(LPO)ELISA試劑盒Gastrin receptor  促胃泌素受體抗體20 ul

過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒GATA-3  GATA結(jié)合蛋白3抗體100 ul

過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒GATA-4  GATA結(jié)合蛋白4抗體400 ul

過氧化氫酶(CAT)ELISA試劑盒GATA-5  GATA結(jié)合蛋白5抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。