PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來(lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶9(FUT9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　漫游孢囊菌屬　500mg

氨基酰化酶2(ACY2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　枯草芽孢桿菌 B　25g

內(nèi)收蛋白3(ADD3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　稻麥穗孢霉　5g

內(nèi)收蛋白2(ADD2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　無(wú)花果曲霉　1g

腺苷酸激酶3(AK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　刺芹側(cè)耳（杏鮑菇）　25g

腺苷酸激酶4(AK4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　傳染性法氏囊病病毒　5g

腺苷酸激酶1(AK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　金太陽(yáng)杏葉細(xì)菌性穿孔病　100g

外核苷酸焦酸酶/酸二酯酶3(ENPP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　青灰紅菇　25g

堿核蛋白2(BNC2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　金黃殼囊孢菌　100g

布皮質(zhì)素4(BEST4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　大腸埃希氏菌　25g

布皮質(zhì)素3(BEST3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　木糖葡萄球菌　100ml

布皮質(zhì)素2(BEST2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　木霉　25ml

鈣蛋白酶6(CAPN6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　構(gòu)巢曲霉　100g

鈣蛋白酶7(CAPN7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　刺孢小克銀漢霉輪生變種　25g

鈣蛋白酶11(CAPN11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　墳?zāi)构?jié)桿菌　1g

鈣蛋白2(CAPS2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　賴氨酸芽孢桿菌　5g

羰基還原酶3(CBR3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　三葉草根瘤菌　1g

中心體蛋白3(CETN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　賴氨酸芽胞桿菌屬　25g
小蛇菌屬通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒轉(zhuǎn)錄因子EYA1抗體CD56/NCAM1 (Neural Cell Adhesion Molecule 1)  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1(抗原)20 ul

酸化埃茲蛋白抗體CEAcam8/CD67 (carcinoembryonic gen-relad cell adhesion molecule 8)  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8（抗原）100 ug

嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗體CD68  CD68抗原100 ul

E1A樣分化抑制因子3抗體CD68  CD68（多肽抗原）100 ul

骨骼肌化酶抗體CD117/c-kit/SCFR  干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/細(xì)胞表面分化抗原（抗原）500 ul

真核翻譯起始因子2C1抗體CD133 gen  造血干細(xì)胞抗原（多肽抗原）100 ul

酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproinase inducer)  CD147(抗原)100 ul

附睪蛋白酶抑制蛋白CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1；Siglec-1)  CD169抗原100 ul

內(nèi)皮素B受體抗體CD272/BTLA(B and T lymphocy atnuator)  B 和 T 淋巴細(xì)胞衰減蛋白(抗原)100 ul