PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
索拉非尼C22H28N2O4辛酸酯

二酸組；酸組C17H24O52-氨基-5-溴-羥基嘧啶

酸氯喹,氯喹二酸鹽C19H26O72,6-二氯甲

(-)-莨菪,L-天仙子，L-天仙子C20H24O72H-2-乙酸 -1,2,三氮唑

(-)-莨菪,L-天仙子，澳洲毒茄(標準品)C20H18O10對甲氧基乙

葡聚糖D70/右旋糖苷C7H7NO2并噻唑-2-乙

右旋糖苷/葡聚糖D40C44H64O242-基-

葡聚糖D20/右旋糖苷C22H33NO25-溴-1-甲基-1,2,噻唑

沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽C24H39NO62-氟-5-吡啶酸

表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG95%）C46H58N4O92-氯-甲基-5-溴吡啶

達沙替尼一水合物C7H6O4L-甲氧基扁桃酸

依西美坦C8H8O21,2-二乙

依西美坦(標準品)C7H6O31-氨基-2-甲基-2-

氨基比林C5H4O3乙基香蘭素縮

馬來酸氯那敏/撲爾敏C40H56O2間氯異酸酯

馬來酸氯那敏/撲爾敏(標準品)C36H36N2O8N-甲基-甲氧基芐

血管緊張素IIC21H20O10氯-三氟乙

維生素 D3 ((膽骨化)C34H30O15氯-2-溴甲
馬節(jié)桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒CD9/MRP-1  CD9蛋白抗體100 ul

分泌型脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒CD40L  CD40L抗體100 ul

肺炎支原體(MP)抗體(IgG)ELISA試劑盒Ingrin alpha 2b/CD41  血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體100 ul

肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒CD43/SPN  CD43抗體1 Kit

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒CD44/PGP1  CD44抗體100 ul

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒CD44v4  CD44V4抗體100 ul

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒CD44v5  CD44V5抗體100 ul

肺表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒CD44v6  CD44V6抗體100 ul

肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒CD44v7  CD44V7抗體1 Kit