產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:倍贊氏金蠅PCR檢測試劑盒規格 英文名稱:Chrysomya bezzianaPCR 編號:HE30812-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 4-苯甲酰吡啶 4-Benzoylpyridine >99.0%(T) 質量規格:BR,50u/mg 包裝;1g 3-苯甲酰吡啶 3-Benzoylpyridine >99.0%(GC) 質量規格:>95%,BR 包裝;250mg 3-苯甲酰吡啶 3-Benzoylpyridine >99.0%(GC) 質量規格:HPLC≥95%,標準品 包裝;100g 2-苯甲酰吡啶 2-Benzoylpyridine >99.0%(GC&T) 質量規格:>98%,BR 包裝;25g 2-苯甲酰吡啶 2-Benzoylpyridine >99.0%(GC&T) 質量規格:>98.5%,BR 包裝;5g 2-苯甲酰吡啶 2-Benzoylpyridine >99.0%(GC&T) 質量規格:含量測定 包裝;1g 苯甲酰-DL-苯丙氨酸 Benzoyl-DL-phenylalanine >98.0%(T) 質量規格:進分;SigmaP8169 包裝;5g 2-萘苯基酮 2-Naphthyl Phenyl Ketone >98.0%(GC) 質量規格:>98.5% 包裝;25g 2-萘苯基酮 2-Naphthyl Phenyl Ketone >98.0%(GC) 質量規格:AR 包裝;5g 苯甲酰基-DL-蛋氨酸 Benzoyl-DL-methionine >99.0%(T) 質量規格:AR 包裝;100g 苯甲酰基-DL-蛋氨酸 Benzoyl-DL-methionine >99.0%(T) 質量規格:>98%,美國進口原裝 包裝;25g 3,3'-(3,3'-二甲氧基-4,4'-二亞苯基雙(2-苯基-5-藜蘆基氯化四氮唑) 3,3'-(3,3'-Dimethoxy-4,4'-diphenylene)bis(2-phenyl-5-veratryltetrazolium Chloride) 質量規格:HPLC≥90%,標準品 包裝;25g 2,3-二(對甲苯基)-5-苯基氯化四氮唑 2,3-Di(p-tolyl)-5-phenyltetrazolium Chloride >98.0%(T) 質量規格:AR 包裝;5g 2,3-二苯基-5-(4-甲氧苯基)氯化四氮唑 2,3-Diphenyl-5-(4-methoxyphenyl)tetrazolium Chloride >80.0%(T) 質量規格:>98% 包裝;1g 1,5-二苯基-3-(對甲苯基)甲臢 1,5-Diphenyl-3-(p-tolyl)formazan >95.0%(LC) 質量規格:>98% 包裝;25g 2-(2-苯并噻唑基) -3,5-二苯基溴化四氮唑 2-(2-Benzothiazolyl)-3,5-diphenyltetrazolium Bromide >95.0%(T) 質量規格:>99%,USP 包裝;5g 2,3-二苯基-5-(4-)氯化四氮唑 2,3-Diphenyl-5-(4-chlorophenyl)tetrazolium Chloride >92.0%(T) 質量規格:>99%,BR 包裝;100g 倍贊氏金蠅PCR檢測試劑盒規格 Cercospora│variicolor G. Winter 中文名稱:雜色尾孢種屬:Cercospora│variicolor G. Winter分離基物:牡丹葉片提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99% Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 中文名稱:貝倫格葡萄座腔菌種屬:Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物:蘋果枝干提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99% Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen 中文名稱:北方蜜環菌種屬:Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen分離基物:樺樹提供形式:斜面培養物模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:24存儲條件:定期移植法 純度:97% Trichothecium│roseum (Pers.) Link 中文名稱:粉紅聚端孢霉種屬:Trichothecium│roseum (Pers.) Link分離基物:刺玫葉部提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97% Prathoda│longissima (Deighton & MacGarvie) E.G. Simmons 中文名稱:長極鏈格孢種屬:Prathoda│longissima (Deighton & MacGarvie) E.G. Simmons分離基物:玉米葉部提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97% Lycoperdon│pusillum Batsch 中文名稱:小馬勃種屬:Lycoperdon│pusillum Batsch提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:100 ng/ul 基體:乙腈 Leucoagaricus│leucothites (Vittad.) Wasser 中文名稱:純白環菇種屬:Leucoagaricus│leucothites (Vittad.) Wasser提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99% Alternaria│cucumerina (Ellis & Everh.) J.A. Elliott 中文名稱:瓜鏈格孢種屬:Alternaria│cucumerina (Ellis & Everh.) J.A. Elliott分離基物:黃瓜葉部提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99% 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |