實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

異丁氧乙酯 ≥98%, FCC小鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)免疫試劑盒BTBD6蛋白抗體SIRT1  沉默調節蛋白1抗體

迷迭香油 FCC小鼠低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒BMP內皮調節蛋白抗體SIPA1L2  信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2抗體

乙硫噻唑 99%小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測免疫試劑盒肝病NS5A反轉錄蛋白8抗體SIPA1  信號誘導增殖相關蛋白1抗體

丁香 98%小鼠蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒骨形態發生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切酶抗體SIP1/ZEB-2  運動神經元存活蛋白結合蛋白1抗體

蘇合香酯  97%小鼠蛋白激酶B(PKB)免疫試劑盒骨形態發生蛋白9抗體SIP1  Smad蛋白相互作用蛋白1抗體

麝香T 98%小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)免疫試劑盒微管蛋白β輔助因子D抗體Sin3b  轉錄抑制蛋白Sin3b抗體

麝香T ≥98%, Kosher小鼠膽堿乙酰轉移酶(ChAT)免疫試劑盒鈣粘蛋白相關蛋白受體BTR1抗體Signal recognition particle  信號識別顆粒抗體

麝香草酚 AR,98%小鼠膽固酯轉移蛋白(CETP)免疫試劑盒有絲分裂蛋白BUB3抗體Sigma1R  衰老相關因8蛋白抗體

麝香草酚  >99.0%(GC)小鼠膽固(CH)免疫試劑盒p60TRP蛋白抗體SIGLEC9  唾液結合免疫球蛋白樣凝集素9抗體

四氫芳樟 98%小鼠單克隆抗體亞型鑒定免疫試劑盒博萊霉素水解酶抗體SIGLEC14  唾液結合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體

四氫香葉  98%小鼠單核趨化蛋白5(MCP-5)免疫試劑盒短蛋白聚糖抗體SIGLEC11  唾液結合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體

麝香草酚 ≥99%, FCC小鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒BTB/POZ結構域蛋白3抗體SIGLEC10/SLG2  唾液結合性免疫球蛋白樣凝集素抗體

10-十一烯 98%小鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體Sidekick 2  粘附分子伴侶蛋白2抗體

桃 98%小鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒堿性亮氨拉鏈蛋白BZW1抗體Sidekick 1  粘附分子伴侶蛋白1抗體

10-十一烯 97%小鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒骨形態發生蛋白受體1B抗體SIAH2  泛素連接酶Siah2
亮氨酸氨基肽酶（LAP）纖毛內轉運同源蛋白43抗體短葶山麥冬皂苷C（標準品） Cinepazide maleate

纖毛內轉運同源蛋白80抗體短葉松素(標準品) Cinepazide maleate

CD101抗體斷血流皂苷A（標準品） Sodium sulfadiazine(SD-Na)

免疫球蛋白超家族成員5抗體對氧 Sodium sulfadiazine(SD-Na)

alpha干擾素誘導蛋白27樣蛋白2抗體對羥(標準品) 4,4-Diethoxybutylamine

胰島素抗體對香豆;對羥肉桂(標準品) 4-Isopropoxyethoxymethylphenol

對葉百部（標準品） AVL-292

中間絲家族孤啡肽2蛋白抗體對葉百部三鹽 5-Methylnicotinic acid

CD339抗體盾葉薯蕷（標準品） 5-Fluoroindole-2-carboxylic acid

成纖維生長因子11抗體IL-20/FITC  熒光素標記白介素-20抗體IgG

HSD13蛋白抗體IL-21/FITC  熒光素標記白介素21抗體IgG