特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 羊血吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Schistosoma mattheei, | 貨號 | YSP97183 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。 正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。 當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術的缺點: 成本高; 設計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 輸入蛋白4(IPO4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 刺孢小殼銀漢霉 500g 輸入蛋白5(IPO5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 型 Aeromicrobium marinum 250g 輸入蛋白7(IPO7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 95% 硬結節(jié)桿菌 5g 輸入蛋白9(IPO9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 白環(huán)柄菇 100g 輸入蛋白11(IPO11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 產(chǎn)黃青霉 25g 輸入蛋白13(IPO13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素C型 1g 耐扭蛋白2A(TOR2A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 豇豆慢生根瘤菌 25g 白介素22受體(IL2R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 檸條根瘤菌 5g 膜聯(lián)蛋白A9(ANXA9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >97.0%(T) 枯草芽孢桿菌 1g 膜聯(lián)蛋白A10(ANXA10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >97.0%(T) 蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌) 500mg 膜聯(lián)蛋白A7(ANXA7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >97.0%(T) 芽孢桿菌 5g 膜聯(lián)蛋白A13(ANXA13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥95% 鏈霉菌 100mg 膜聯(lián)蛋白A8(ANXA8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 廣食黃桿菌 25g Pannexin 1蛋白(PANX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 糖化酵母 5g Pannexin 2蛋白(PANX2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 青貯窖芽孢桿菌 1g Pannexin 3蛋白(PANX3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 枯草芽孢桿菌 250mg 白介素1ζ(IL1ζ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 釀酒酵母 5g 白介素1ε(IL1ε)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 枯草芽孢桿菌 1g 羊血吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 (Vascular Epidemal growth factor receptor-2) 血管內(nèi)皮生長因子受體2抗原100 ul 酸化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體sVEGFR2/sFLK-1(truncad soluble vascular endothelial growth factor receptor 2)human 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗原()20 ul 酸化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A3+A4+A5抗體VEGFR-3/FLt-4 血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(多肽)100 ul 轉錄因子Ets差異基因5抗體VEGFR-3(Vascular Epidemal growth factor receptor-3) 血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3抗原100 ul E選擇素抗體VWF (Von Willebrand Factor) 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原100 ul 大腸桿菌耐熱性腸毒素抗體Wnt1 信號通路Wnt1抗原100 ul 泛素激活酶E1抗體WWOX (WW domain-containing oxidoreductase) 包含氧化還原酶的WW域抗原100 ul 表皮生長因子受體抗體XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Proin) X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原20 ul Ets轉錄因子家族ets1抗體XAF1(XIAP-associad factor 1) XIAP相關因子1凋亡抑制蛋白抗原100 ul |