實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

牛蒡子苷 分析標準品，>98% 一氧化氮合成酶-2抗體（誘導型）Fetuin beta  胎球蛋白B抗體(Fetuin β)

 分析標準品干擾素α6抗體FES  原癌因酪氨蛋白激酶FES抗體

積雪草  98%整合素β2/Integrin β2抗體Ferritin Light Chain  鐵蛋白輕鏈抗體

 分析標準品，≥97%抑制素A/Inhibin βA抗體Ferritin  鐵蛋白抗體

土木香內酯 分析標準品，≥97%(HPLC)胰島素受體底物-3抗體FER/TYK3  酪氨蛋白激酶3抗體

異補骨脂素 分析標準品，>98%胰島素受體底物p53蛋白抗體FEN1  結構特異性核酶FEN1抗體

蘆薈寧 分析標準品，≥99%胰島素受體底物-1抗體FEM1A  前列腺素E受體4相關蛋白抗體

脫水羊藿素 分析標準品,≥99%(HPLC)胰島素受體底物-2抗體FEM 1B  FEM1B抗體

硫辛 98%胰島素受體底物-4抗體FECH/Ferrochelatase  鐵螯合酶抗體

白果內酯 分析標準品，≥99%白介素14抗體FDC-SP/ADC  濾泡樹突分泌蛋白抗體

甜菜堿,無水 98%腫瘤凋亡ASPP家族的另一個成員抗體FCHSD1  FCHSD1蛋白抗體

黃芩素 分析標準品，≥98%Caspase激活的脫氧核糖核酶抑制劑抗體FCAR/CD89  免疫球蛋白A Fc段受體1抗體

黃芩素 98%胰島素受體α抗體Fc ε RIα/Fc epsilon RI  FC段IgE受體α多肽抗體

鹽小檗堿 98%整合素α3β1抗體Fc γ RII a/CD32  免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體

(+)- 分析標準品，≥98% (GC)整合素β7抗體Fc γ RII a/CD32  免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體
血鎂濃度測試盒質分裂付出蛋白1抗體鹽格拉司瓊（標準品） Solamargine

腦表皮生長因子跨膜蛋白DNER抗體鹽關附素（標準品） Solasonine

DUX3蛋白抗體鹽環沙星（標準品） Angoroside C

死亡相關蛋白1抗體鹽環侖特羅（標準品） Toremifene

軸絲動力蛋白重鏈9抗體鹽黃哌酯（標準品） Toremifene

化動力相關蛋白1抗體鹽噻/泊酚雜質J(標準品) Neratinib(HKI-272)

DNA連接酶4抗體鹽芬酯(標準品) Methyl Protodioscin

二肽肽酶6抗體鹽氧那明（標準品） Gracillin

二氫葉還原酶抗體鹽金剛烷（標準品） Yohimbine HCl

糖脂酰肌錨連接蛋白1抗體PH-4/FITC  熒光素標記脯氨水解酶4抗體IgG

3-甘油酰轉移酶2抗體PHB/FITC  熒光素標記抑制素/腫瘤抑制因子抗體IgG