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副牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒

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更新日期:
2020-11-16
點(diǎn)擊次數(shù):
593
產(chǎn)品特點(diǎn):
副牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
  50T副牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

副牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒

 英文名稱(chēng)

 Paravaccinia VirusRTPCR

 貨號(hào)

 HE31351-R

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

?
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上樣緩沖液 (含DTT)  5ml 英文名稱(chēng) Tris-Tricine-SDS-PAGE Loading buffer,2×(with DTT)儲(chǔ)存條件 -20℃,避光,有效期1年單位 瓶產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 本產(chǎn)品適用于Tricine-SDS-PAGE電泳時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,DTT,考馬斯亮藍(lán),緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS還可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),DTT可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。考馬斯亮藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。 使用說(shuō)明:    1.請(qǐng)按每20微升蛋白樣品加入20微升上樣緩沖液的比例來(lái)使用。如果蛋白濃度過(guò)高,可用雙蒸水稀釋。    2.混勻后,100℃水浴加熱5-10分鐘,使蛋白變性。    3.冷卻至室溫后,離心數(shù)秒后,混勻再離心30秒取上清直接上樣即可。 

2×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)  10ml 別名 2×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)英文名稱(chēng) SDS-PAGE loading buffer,2×(with β-Mercaptoethanol)儲(chǔ)存條件 建議分裝凍存,避免反復(fù)凍融,-20℃,有效期1年單位 瓶保存: -20℃保存,有效期一年。 產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,β-巰基乙醇,溴酚藍(lán),緩沖鹽溶液等。 SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS還可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu);β-巰基乙醇可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān);溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。 使用說(shuō)明: 1. 請(qǐng)按每10μL蛋白樣品加入10μL上樣緩沖液的比例(2倍稀釋?zhuān)﹣?lái)使用。如果蛋白濃度過(guò)高,可用雙蒸水稀釋樣品。 2. 混勻后,100℃水浴加熱3-5分鐘,使蛋白變性。 3. 冷卻到室溫后,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。 

2×蛋白上樣緩沖液(含DTT)  10ml 別名 2×蛋白上樣緩沖液(含DTT)英文名稱(chēng) SDS-PAGE loading buffer,2×(with DTT)儲(chǔ)存條件 -20℃,有效期1年保存:-20℃保存,自發(fā)貨之日起至少12個(gè)月有效。開(kāi)封后建議分裝凍存,避免反復(fù)凍融。 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:     本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,DTT,溴酚藍(lán),緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS還可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),DTT可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。 使用說(shuō)明:     1.請(qǐng)按每20微升蛋白樣品加入20微升上樣緩沖液的比例來(lái)使用。如果蛋白濃度過(guò)高,可用雙蒸水稀釋。     2.混勻后,100℃水浴加熱5-10分鐘,使蛋白變性。     3.冷卻至室溫后,離心數(shù)秒后,混勻再離心30秒取上清直接上樣即可。  

次高分子量蛋白質(zhì)Marker(43-200kDa)  10T 別名 Protein Marker(43kD-200kD)儲(chǔ)存條件 -20℃,有效期1年本產(chǎn)品包含5種蛋白質(zhì)混合物,分子量范圍為43kD-200kD,條帶分別為:43,66.2,97.4,130,200。經(jīng)過(guò)SDSPAGE電泳,用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到分布均勻密度相近的5條帶。可以用來(lái)判斷SDS-PAGE電泳后蛋白質(zhì)的分子量。-20℃可保存至少六個(gè)月。避免反復(fù)凍融,建議分裝后于-20℃保存。 使用說(shuō)明: 1.開(kāi)封后,可根據(jù)需要分裝成小管,建議每管分裝10μl,-20℃貯存,每次取一管使用。 2.本產(chǎn)品已經(jīng)含有了上樣緩沖液,使用前取分裝后的小管65℃預(yù)熱5分鐘即可上樣進(jìn)行電泳,上樣量5-10μl。 3.建議分離膠濃度為8%。 

40%制膠液(19:1)  100ml 英文名稱(chēng) 2-8℃,避光,有效期1年儲(chǔ)存條件 4℃避光保存有效期一般1年單位 瓶
副牛痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒膜粘連蛋白11抗體Quinine別名: 分子式: C20H24N2O2性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗瘧;金雞納屬;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

膜粘連蛋白13抗體Quinamine別名: 分子式: C19H24N2O2性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 金雞納屬;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體1-Methyl-2-nonylquinolin-4(1H)-one別名: 分子式: C19H27NO性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 吳茱萸屬;喹啉酮;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化蛋白激酶AKT1抗體Cinchonine別名: 分子式: C19H22N2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗瘧;金雞納屬;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化蛋白激酶B抗體Carmichaenine B別名: 分子式: C23H37NO7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體3,4-Dimethoxybenzamide別名: 分子式: C9H11NO3性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化內(nèi)收蛋白a1抗體Carmichaenine D別名: 分子式: C29H39NO7性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗體Neolinine別名: 分子式: C23H37NO6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 烏頭屬;烏頭生物堿;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 副牛痘病毒 PCR檢測(cè)試劑盒 50T
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