服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Histoplasm spp.PCR | 貨號(hào) | HE31087-R |
實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 ? 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂/脫氧膽酸鈉枸櫞酸鹽瓊脂/Desoxycholate Citrate Agar 包裝;5g 去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂/DCLS瓊脂/DCLS Agar 包裝;25g V-J瓊脂/Vogel-Johnson瓊脂/VJ瓊脂/伏戈?duì)?瓊脂/沃格爾*瓊脂/VJ Agar 包裝;5g NAC瓊脂培養(yǎng)基/NAC Agar Medium 包裝;1g 馬鈴薯葡萄糖瓊脂/PDA瓊脂/Potato Dextrose Agar 包裝;25g 亮綠瓊脂培養(yǎng)基/Brilliant Green Agar 包裝;5g 梭菌增菌培養(yǎng)基/梭菌培養(yǎng)基/Clostridium Enrichment Medium 包裝;1g 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基/Columbia Agar Medium 包裝;25g 哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基/Columbia-MUG Medium 包裝;5g 哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)/Columbia Blood Agar Base 包裝;100g 2216E瓊脂/2216E Agar 包裝;25G BDS培養(yǎng)基/BDS Medium 包裝;1g 葡萄糖瓊脂/Dextrose Agar 包裝;250mg Andrade氏糖類肉湯/安德雷德氏糖類肉湯/Andrade,s Carbohydrate Broth 包裝;500g 硝酸鹽培養(yǎng)基/硝酸鹽肉湯/Nitrate Medium 包裝;100g 硝酸鹽蛋白胨培養(yǎng)基/硝酸鹽胨培養(yǎng)基/Nitrate Peptone Medium 包裝;100g 氧化發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)基/OF培養(yǎng)基/Hugh-Leifson培養(yǎng)基/HLGB 包裝;500g 組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒Lysinibacillus│macroides 中文名稱:長形賴氨酸芽胞桿菌種屬:Lysinibacillus│macroides分離基物:樣/養(yǎng)豬場沼氣池沼液提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的生物轉(zhuǎn)化微生物/未經(jīng)過單菌驗(yàn)證的反硝化菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Marinobacter│algicola 中文名稱:棲藻海桿菌種屬:Marinobacter│algicola分離基物:樣/深層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:南大西洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Alcanivorax│borkumensis 中文名稱:泊庫島食烷菌種屬:Alcanivorax│borkumensis分離基物:樣/下層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自柴油原油混合富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1001生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Marinobacter│sp. 中文名稱:海桿菌種屬:Marinobacter│sp.分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)酶微生物/脂酶(Tween 80)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Idiomarina│loihiensis 中文名稱:羅伊赫海源菌種屬:Idiomarina│loihiensis分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Sulfitobacter│pontiacus 中文名稱:龐蒂亞克亞硫酸鹽桿菌種屬:Sulfitobacter│pontiacus分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物轉(zhuǎn)化微生物/固氮菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Marinobacter│vinifirmus 中文名稱:強(qiáng)酒海桿菌種屬:Marinobacter│vinifirmus分離基物:沉積物/TVMC沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機(jī)物降解菌/可降解乙醛(已單菌驗(yàn)證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Brevibacterium│epidermidis 中文名稱:表皮短桿菌種屬:Brevibacterium│epidermidis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自苯酚富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% |