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丙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-10
點擊次數:
862
產品特點:
丙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T丙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

丙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Hepatitis C Virus(HCV)1RTPCR

 貨號

 HE31073-R

實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

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特點優勢:
    1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
毛蕊花糖苷/毛蕊花甙/麥角甾苷/類葉升麻苷/Verbascoside 包裝;500g

表兒茶素沒食子酸酯/表兒茶精沒食子酸酯/(-)-表兒茶素沒食子酸酯/表兒茶來沒食子酸酯/ECG 包裝;100mg

異綠原酸A/3,5-二咖啡??鼘幩?Isochlorogenic acid A 包裝;1g

異綠原酸B /3,4-二咖啡??鼘幩?Isochlorogenic acid B 包裝;250mg

二異丙基偶氮羥酸鹽/偶氮二甲酸二異丙酯/偶氮二羧酸異丙酯/偶氮二羧酸二異丙酯/偶氮二異丙基二羧酸/偶氮二甲酸二異丙基酯/DIAD 包裝;1g

1,8-二氮雜-9-芴酮/1,8-二氮雜芴-9-酮/1,8-二氮-9-芴酮/DFO 包裝;25g

二聚對二甲苯/對二甲苯二聚體/對環芳烷/三環[8.2.2.24,7]十六碳-1(12),4,6,10,13,15-六烯/[2,2]二聚對二甲苯/[2.2]對環芳烷/對二甲苯環二體/PCF 包裝;5g

15-冠-5/冠醚/15-冠醚-5/15-冠-5醚/1,4,7,10,13-五氧環十五烷/15-Crown-5 包裝;10ml

12-冠醚-4/1,4,7,10-四氧(雜)環十二烷/1,4,7,10-四氧環十二烷/12-冠-4/12-冠4-醚/12-Crown-4 包裝;50ml

二苯并-18-冠醚-6/苯并-18-冠(醚)-6/二苯基十八冠六聚/二苯并十八冠六聚/二苯-18-框-6/二苯并-18-冠醚-6/Dibenzo-18-crown-6 包裝;1g

苯并-18-冠醚-6/2,3,5,6,8,9,11,12,14,15-十氫-1,4,7,10,13,16-苯并六氧(雜)環十八烯/苯并-18-冠-6-醚/苯并-18-冠-6/Benzo-18-crown-6 包裝;25g

偶氮二甲酸二芐酯/偶氮二羥酸二芐酯/Dibenzyl azodicarboxylate 包裝;5g

丹參素/β-(3,4-二羥基苯基)乳酸/丹參酸甲/Danshensu 包裝;100mg

1,3-丙烷磺內酯/1,2-氧雜硫代羥烷-2,2-二氧化物/1,3-丙磺酸內酯/1,3-丙基磺酸內酯/1,3-丙磺內酯/丙磺酸內酯/1,3-丙烷磺酸內酯/1,3-Propanesultone 包裝;50mg

1,3-二甲基咪唑啉酮/1,3-二甲基-2-咪唑啉酮/1,3-二甲基-2-咪唑烷酮/N,N’-二甲基亞乙基脲/1,3-二甲基-2-咪唑酮/1,3-二甲咪唑啉酮/DMI/DMEU 包裝;1g

4-氟苯基醋酸酯/4-氟苯基乙酸酯/乙酸(4-氟)苯酯/乙酸-4-氟苯基酯/對氟苯基醋酸酯/醋酸4-氟苯基酯/4-Fluorophenyl acetate 包裝;5g

四乙二醇二對甲苯磺酸酯/四甘醇雙(對甲苯鹽酸鹽)/四乙二醇雙(對甲苯磺酸酯)/Tetraethylene Glycol Di-p-tosylate 包裝;1g
丙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒說明書Aspergillus phoenicis 中文名稱:海棗曲霉種屬:Aspergillus phoenicis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:Type strain of A. saitoi培養方法培養基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Cephalosporium│sp. 中文名稱:頭孢霉種屬:Cephalosporium│sp.分離基物:冬蟲夏草提供形式:斜面培養物;凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:15℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%

Gluconacetobacter xylinum 中文名稱:木醋桿菌種屬:Gluconacetobacter xylinum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:Type strain;細菌纖維素培養方法培養基:醋酸菌培養基:葡萄糖100.0g ,酵母提取物 10.0 g ,CaCO3 20.0 g ,瓊脂15.0 g ,蒸餾,1.0 L ,pH 6.8生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%

Pediococcus pentosaceus 中文名稱:戊糖片球菌種屬:Pediococcus pentosaceus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:MRS生長條件:37℃,兼性厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%

Cystobacter│violaceus 中文名稱:紫色孢囊桿菌種屬:Cystobacter│violaceus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:作為粘細菌聚酮合酶的的基因篩選庫,分析和篩選聚酮基因的多樣性培養方法培養基:844生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度:98%

Nannocystis│exedens 中文名稱:侵蝕侏儒囊菌種屬:Nannocystis│exedens提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:作為粘細菌聚酮合酶的的基因篩選庫,分析和篩選聚酮基因的多樣性培養方法培養基:844生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度:98%

Myxococcus│stipitatus 中文名稱:葉柄粘球菌種屬:Myxococcus│stipitatus分離基物:兔糞粒提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:粘細菌分類及菌庫構建培養方法培養基:844生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:AR,80%

Myxococcus│fulvus 中文名稱:橙色粘球菌種屬:Myxococcus│fulvus分離基物:楊樹皮提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:粘細菌分類及藥物篩選培養方法培養基:847生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:AR,80%

 

產品相關關鍵字: 丙型肝炎病毒型 PCR檢測試劑盒 50T
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