PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來(lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
鏈霉親和素Phospho-c-Cbl (Tyr774) Antibody(2R,4S)-羥基吡咯烷-2-羧酸

西他沙星Phospho-RSK2 (Ser227) (D53A11) Rabbit mAb酸甲酯

DHBS；3,5-二氯-2-羥基磺酸鈉TGM2 (D11A6) XP® Rabbit mAb氯-甲

NBD-PZ；硝基-7-哌并氧雜噁二唑TGM2 (D11A6) XP® Rabbit mAbL-酪氨酸甲酯鹽酸鹽

BGP；β-甘油酸鈉水合物(高純)LDHA/LDHC (C28H7) Rabbit mAb6-甲基吲哚

Fura 2-AM;鈣熒光探針Progesrone Receptor A/B (D8Q2J) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)三水六氟酮

NBD-F；氟-7-硝基-2,1,并氧雜惡二唑CCT2 Antibody溴噻唑

魯米諾,發(fā)光氨Acetyl-α-Tubulin (Lys40) (D20G3) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-氨基-甲基-5-溴吡啶

Leu-pNA；L-亮氨酸-CRMP-2 (D8L6V) Rabbit mAb2-噻吩

BAEE;N-甲酰基-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽SOAT1 Antibody甲基嘧啶

TAME.HCl；NA-P-甲磺基-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽CD34 (ICO115) Mouse mAb溴五氟

AE；N-乙酰-L-酪氨酸乙酯CD44 (156-3C11) Mouse mAb2-氟二酸二甲酯

DAPI；4，’6-二脒基-2-基吲哚CD44 (156-3C11) Mouse mAb2-氨基-5-硝基-2'-氟二甲酮

基-α-D-吡喃半糖苷CD109 Antibody2-氨基-6-(三氟甲基)吡啶

ABTS;2,2'-聯(lián)氨-雙（乙基并噻唑啉-6-磺酸）二鹽Phospho-CD19 (Tyr531) Antibody5-氯-2-氟

β-D-葡糖糖-6-酸鈉鹽Phospho-CD19 (Tyr531) Antibody6-甲氧基-2-萘甲

HEPBS；N-(2-羥乙基)哌-N'-(丁磺酸）PTMScan® Peptide Purification Kit鄰氟氯芐

赫斯特?zé)晒馊剂?3258CD19 Antibody鹽酸洛哌丁
節(jié)瘤擬桿菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒phospho-SHC (Tyr349)  酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體100 ul

高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒phospho-SHC (Tyr427)  酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體20 ul

高半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒phospho-SHC (Tyr317)  酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體100 ul

肝脂酶(HL)ELISA試劑盒phospho-SHC (Tyr239/240)  酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體100 ul

肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒Shiga-like toxin IIe variant subunit A  大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體（O139菌型）抗體100 ul

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)ELISA試劑盒Shh/Sonic hedgehog  Shh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體20 ul

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物(HGFA)ELISA試劑盒OMPC  大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體1 Kit

肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒SHIP1  SH2結(jié)構(gòu)含酸肌醇SHIP1抗體100 ul

肝素結(jié)合EGF樣生長(zhǎng)因子(HBEGF)ELISA試劑盒Phospho-SHIP1 (Tyr1020)  酸化SH2結(jié)構(gòu)含酸肌醇SHIP1抗體100 ul