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普羅威登斯菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-12-03
點擊次數(shù):
715
產(chǎn)品特點:
普羅威登斯菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
  50次普羅威登斯菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

熒光定量PCR試劑盒技術:
產(chǎn)品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環(huán)形凸起,兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

 產(chǎn)品名稱

普羅威登斯菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Providencia spp.

 貨號

 YSP97113

樣品RNA的抽提:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 90% 美澳型核果褐腐病菌 1g

白介素31(IL31)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 灰略紅鏈霉菌 100g

多效生長因子(PTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 棱柱散尾菌中華變型 25g

多效生長因子(PTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 日內(nèi)瓦毛霉 5g

多效生長因子(PTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 朱紅栓菌 25g

絲切蛋白1(CFL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 慢生根瘤菌 5g

絲切蛋白1(CFL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥98% 解脂亞羅酵母 100mg

淋巴毒素β(LTβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥98% 弗氏檸檬酸桿菌 500mg

淋巴毒素β(LTβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 鴨疫里氏桿菌 1g

溶酶體關聯(lián)膜蛋白1(LAMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 焦曲霉 5g

CD200受體2(CD200R2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥97% 貽貝弧菌 25g

膽綠素還原酶B(BLVRB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥97% 蘇云金芽孢桿菌 5g

膽綠素還原酶A(BLVRA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >97.0%(GC) 旋毛殼 25g

粒細胞趨化蛋白2(GCP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >97.0%(GC) 莖點霉屬 5g

二級淋巴組織趨化因子(SLC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 鮑姆木層孔菌 100g

B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 胞外多聚物鞘氨醇單胞菌 1g

B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 地衣芽孢桿菌 25g

胸腎表達趨化因子(BRAK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 福氏志賀氏菌 5g
普羅威登斯菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒跨膜TMIGD1蛋白抗體CD56/NCAM1(Neural Cell Adhesion Molecule 1)  神經(jīng)細胞粘附分子1抗原1 Kit

軸絲中鏈動力蛋白抗體CD62L (ELAM-1/L-Selectin )  L選擇素抗原1 Kit

軸絲動力蛋白7抗體E-Selectin  E選擇素抗原100 ul

環(huán)指蛋白19抗體CD80/B7-1(human)  刺激分子B7-1蛋白抗原100 ul

δ-連環(huán)蛋白抗體CD80/B7-1  刺激分子B7-1蛋白抗原100 ul

防御素β2抗體CD82/KAI1 peptide  腫瘤轉移抑制蛋白1抗原1 Kit

酸化信號轉導功能蛋白DAB2抗體CD86/B7-2  CD86抗原1 Kit

雙氧化酶1/甲狀腺氧化酶1抗體Cdc2/P34CDC2/CDK1(Cell division control proin 2)  周期素依賴激酶1抗原1 Kit

雙氧化酶2/甲狀腺氧化酶2抗體CD339/Jagged1  CD339/Jagged1抗原1 Kit

 

產(chǎn)品相關關鍵字: 普羅威登斯菌通用 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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