產品名稱:乙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱:Hepatitis B Virus(HBV)APCR 編號:HE31071-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 ? 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 鄰苯二甲酸二苯酯/2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基/1,2-苯二甲酸二苯酯/苯二甲酸苯酯/鄰酞酸二苯酯/Diphenyl phthalate 包裝;25g 三梔子甙甲酯/山梔苷甲酯/山梔甙甲酯/Shanzhisize methyl ester 包裝;5g 三酐/三氟醋酸酐/三氟乙酐/三氟醋酐/TFAH/TFAA 包裝;1g 亞磷酸三乙酯/三乙基亞磷酸酯/三乙氧基膦/Triethyl phosphite 包裝;5g 甘氨酸-脯氨酸-7-氨基-4-三氟甲基/Gly-Pro-AMC 包裝;100g 3,5-二甲苯酚/3,5-二甲酚/3,5-二甲基苯酚/1-羥基-3,5-二甲基苯/1,3,5-二甲苯酚/1,3-二甲苯-5-酚/1,3-二甲基-5-羥基苯/3,5-二甲苯-1-酚/3,5-Dimethylphenol 包裝;25g 間乙酮/3-乙酮/1-(3-基)乙酮/間硝基乙酰苯/3-硝基乙酰苯/3′-Nitroacetophenone 包裝;250ml 3-氨基苯硼酸/間氨基苯硼酸/3-氨基苯基硼酸/3-Aminobenzeneboronic acid 包裝;100g 4-乙烯基苯硼酸/4-苯乙烯硼酸/4-乙烯基苯基硼酸/4-Vinylphenylboronic acid 包裝;25g 噠螨靈/2-叔丁基-5-(4-叔丁芐基硫)代-4-氯-3(二氫)噠嗪酮/2-特丁基-5-(4-特丁芐基)硫代-4-氯-3(2氫)-噠嗪酮/達螨盡/滅特靈/牽牛星/速螨酮/2-特丁基-5-(4-特丁基芐硫基)-4-氯-2H-噠嗪-3-酮/噠螨酮/Pyridaben 包裝;1g 吡蟲靈/脒蚜胺/1-(6-氯-3-吡啶基甲基)-N-硝基亞咪唑烷-2-基胺/吡蟲啉/撲虱蚜乳油/Imidacloprid 包裝;100g 福美雙/ N,N’-四甲基二硫雙硫羰胺/促進劑T/促進劑TMTD/促進劑TMTD-II/促進劑TT/二硫化雙(硫羰基二)/二硫化四甲基秋蘭姆/秋蘭姆/TMTD 包裝;25g 環氧大豆油/環氧豆油/環氧化酸豆油酯/環氧化大豆油/環氧大豆油酸-2-甲基己酯/ESBO 包裝;500g 對甲苯亞磺酸鈉/對甲苯磺酸鈉鹽/SPTS 包裝;100g 氯化花青素/花青素/花色素/元/定/矢車菊素CY/矢車菊素/氯化矢車菊素/Cyanidin chloride 包裝;25g 六氟磷酸鉀/六氟代磷酸鉀鹽/Potassium hexafluorophosphate 包裝;100g 甘氨膽酸/3α,7α,12α-三羥基-5β-膽甾烷-24-羧酸-24-甘氨酰胺/N-[(3α,5β,7α,12α)-3,7,12-三羥基-24-氧代膽甾烷-24-基]甘氨酸/甘膽酸/N-(3,7,12-三羥基-24-羰基膽烷-24-基)-甘氨酸/甘膽酸合物/甘氨石膽酸/Glycocholic acid hydrate 包裝;25g 乙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒Streptomyces│malachiticus 中文名稱:孔雀石綠鏈霉菌種屬:Streptomyces│malachiticus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:331生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Streptomyces│hygroscopicus var. violaceus 中文名稱:吸鏈霉菌紫色變種種屬:Streptomyces│hygroscopicus var. violaceus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:95% Streptomyces│hygroscopicus 中文名稱:刺孢吸鏈霉菌種屬:Streptomyces│hygroscopicus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:12生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:95% Streptomyces│flavorectus 中文名稱:黃直絲鏈霉菌種屬:Streptomyces│flavorectus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:Type strain;對產朊酵母和稻瘟菌有溶菌作用培養方法培養基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Streptomyces│coelicolor 中文名稱:天藍色鏈霉菌種屬:Streptomyces│coelicolor提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Streptomyces│albogriseolus 中文名稱:白淺灰鏈霉菌種屬:Streptomyces│albogriseolus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:Type strain; Produces neomycin complex培養方法培養基:11生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Penicillium ochrochloron 中文名稱:赭綠青霉種屬:Penicillium ochrochloron提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Aspergillus ustus 中文名稱:焦曲霉種屬:Aspergillus ustus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% |