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埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-05
點擊次數(shù):
729
產(chǎn)品特點:
埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Escherichia spp.PCR

 貨號

 HE30973-R

實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

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特點優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
碳酸環(huán)己胺/環(huán)己胺碳酸鹽/CHC 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 包裝;1g

1,1-二蒽醌亞胺/二蒽亞胺/1,1′-聯(lián)蒽醌亞胺/1,1ˊ-亞氨基二蒽醌/1,1′-Dianthrimide 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 包裝;25g

2,6-二氯醌-4-氯亞胺/2,6-二氯醌氯亞胺/2,6-雙氯苯醌氯酰亞胺/2,6-二氯苯醌-4-氯酰亞胺/氯亞胺基二氯醌/2,6-二氯-4-(氯亞胺)-2,5-環(huán)己二烯-1-酮/2,6-二氯苯醌氯亞胺/二氯苯醌氯化亞銨/2,6-Dichloroquinone chlorimide 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 包裝;5g

二氰二胺/氰胍/雙氰胺/二聚氨基氰/二聚氰/二聚氰胺/氰基胍/二氰二氨/Dicyandiamide 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 包裝;1g

二乙胺鹽酸鹽/鹽酸二乙胺/鹽酸氨基二乙烷/二乙基氯化銨/N-乙基乙胺鹽酸鹽/二乙胺氯化氫/Diethylamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 包裝;5g

N,N-二乙基甲酰胺/二乙基甲酰胺/N,N-Diethylformamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;1g

N,N-二甲基乙酰胺/乙酰二/二甲替乙酰胺/二甲基乙酰胺/DMAC/NBS 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;5g

鹽酸鹽/氨基甲烷鹽酸鹽/鹽酸甲基胺/鹽酸/一鹽酸鹽/鹽酸一/Methylamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;100mg

/鹽酸氨基二甲烷/鹽酸二/N-甲基鹽酸鹽/Dimethylamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;50mg

二正辛胺/二辛基胺/N,N-二(甲基庚基)胺/雙(α-辛基)胺/二正辛基胺/Di-n-octylamine 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;5g

二/氨基二苯/N-苯基/N,N-二/苯/二苯基胺/Diphenylamine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g

二磺酸鋇/(苯基氨基)苯磺酸鋇鹽/二磺酸鋇/N-苯基對氨基苯磺酸鋇鹽/二-4-磺酸鋇鹽/磺酸二鋇鹽/4-二磺酸鋇/Barium diphenylamine sulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;5g

二苯基聯(lián)/N,N'-二苯基聯(lián)/N,N-二苯對苯二氨基聯(lián)苯/ N,N'-二苯基聯(lián)苯二胺/N,N'-二苯對氨基聯(lián)苯/N,N'-Diphenylbenzidine 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;25g

乙胺鹽酸鹽/乙基氯化銨/鹽酸一乙胺/一乙胺鹽酸鹽/鹽酸乙胺/氯化乙基氨/Ethylamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g

1,7-庚二胺/1,7-二氨基庚烷/七亞甲基二胺/庚亞甲基二胺/1,7-庚烷二胺/1,7-Diaminoheptane 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T) 包裝;100mg

硫酸肼/硫酸聯(lián)胺/肼硫酸鹽/硫酸聯(lián)氨/Hydrazine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 包裝;5MG

丙二酰胺/Malonamide 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;1g
埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書Pseudogluconobacter│saccharoketogenes 中文名稱:生糖酮假葡糖桿菌種屬:Pseudogluconobacter│saccharoketogenes提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:537生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%

哺乳動物腺病毒屬│3型(GB型) 中文名稱:人腺病毒種屬:哺乳動物腺病毒屬│3型(GB型)分離基物:病料提供形式:凍存管安全等級:3模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:基礎(chǔ)研究培養(yǎng)方法生長條件:37oC存儲條件:-70 純度:97%

Bacillus│azotoformans 中文名稱:產(chǎn)氮芽孢桿菌種屬:Bacillus│azotoformans分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可用于教學(xué)、培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Acidithiobacillus│ferrooxidans 中文名稱:亞鐵氧化酸硫桿狀菌種屬:Acidithiobacillus│ferrooxidans分離基物:礦山酸性中提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:718生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Stenotrophomonas│maltophilia 中文名稱:嗜麥芽窄食單胞菌種屬:Stenotrophomonas│maltophilia分離基物:皮革提供形式:斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制革培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98%

Haemophilus│parasuis 中文名稱:副豬嗜血桿菌種屬:Haemophilus│parasuis分離基物:關(guān)節(jié)液提供形式:斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:流行病學(xué)調(diào)查及疫苗制備研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:451生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98%

Monacrosporium│cionopagum 中文名稱:柱捕單頂孢種屬:Monacrosporium│cionopagum分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:18生長條件:25-28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:98%

Actinomadura,madurae 中文名稱:馬杜拉放線菌種屬:Actinomadura,madurae安全等級:3模式菌株:未知培養(yǎng)方法生長條件:28℃ 純度:97%

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 埃希氏菌通用 PCR檢測試劑盒 50T
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