特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
磺間甲氧嘧啶Calpastatin Antibody溴酮

磺間甲氧嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)環(huán)孢菌素

雷奈酸鍶Cleaved Notch1 (Val1744) (D3B8) Rabbit mAb1,1-二甲基脲

GDC-0941Cleaved Notch1 (Val1744) (D3B8) Rabbit mAb*基乙酸甲酯

L-165041AMPKβ2 Antibody溴-2-氟甲

鹽酸頭孢卡品酯AMPKβ2 Antibody左旋多巴

紅霉素AMPKβ1/2 (57C12) Rabbit mAb氯酸甲酯

紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)AMPKβ1/2 (57C12) Rabbit mAbNG-甲基-L-精氨酸

2，6-二氯靛酚鈉(DCIP)ADAM9 (D64B5) Rabbit mAb四氯噻吩

非諾洛芬鈣ADAM9 (D64B5) Rabbit mAb香豆靈酸甲酯

β-萘酚,異萘酚EGR1 (15F7) Rabbit mAb一水肌酸

氨基酚EGR1 (44D5) Rabbit mAb1,1'-聯(lián)-2-萘酚

鄰二酚EPAC1 (5D3) Mouse mAb3,5-二氯甲

間二酚EPAC2 (5B1) Mouse mAb巰基乙

對叔丁基鄰二酚PZR Antibody離子交換樹脂

(2-噻唑基偶氮)間二酚MTAP AntibodyD-高絲氨酸

鈷試劑(1-亞硝基-2-萘酚)DHX29 Antibody2,3,4,5,6-五氟甲酸

氯磺酚SPhospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) Antibody三
阪崎腸桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒B因子(BF)ELISA試劑盒Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254)  酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體100 ul

B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒Tyk2/Non receptor tyrosine proin kinase 2  非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體1 Kit

B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子,激酶β (IKBKB)ELISA試劑盒Phospho-Tyk2 (Tyr1054/1055)  酸化非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體100 ul

B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)ELISA試劑盒Tyrosine Hydroxylase/TYH/TH   酪氨酸羥化酶抗體150 ul

B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA試劑盒Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40)  酸化酪氨酸羥化酶抗體100 ul

B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31)  酸化酪氨酸羥化酶抗體20 ul

BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒Tyrosinase  酪氨酸酶抗體100 ul

Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)ELISA試劑盒TCRG  T細(xì)胞受體γ抗體1 Kit

ATP1B4蛋白(ATP1B4)ELISA試劑盒T Beta 10  胸腺素β10抗體5 mg