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 首頁>>產(chǎn)品展示>>定量PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>>異尖線蟲屬探針法熒光PCR檢測試劑盒

異尖線蟲屬探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-25
點擊次數(shù):
731
產(chǎn)品特點:
異尖線蟲屬探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次異尖線蟲屬探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

異尖線蟲屬探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Anisakis spp.

貨號

 YSP96376

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
富馬酸伊布利特(標(biāo)準(zhǔn)品)C9H9ClN-Boc-γ-氨基丁酸

硫酸異帕米星C9H8O清酸單水合物

蓓薩羅丁;貝沙羅汀C8H10O2氨基甲酸叔丁酯

蓓薩羅丁(標(biāo)準(zhǔn)品)C9H8O3硫酸原黃素

酮洛芬C7H8O2雙吡啶硫酮

酮洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)C9H11NN-叔丁氧羰基-N'-芴甲氧羰基-D-2,二氨基酸

富馬酸酮替芬C10H14N2O5乙基甲

富馬酸酮替芬(標(biāo)準(zhǔn)品)C23H22O62-甲基丁

酮咯酸C29H36O15溴-5-硝基-2-噻吩甲

來氟米特C20H16O54,5,6-三氯嘧啶

來氟米特(標(biāo)準(zhǔn)品)C43H32O202-甲基吲哚林

左氧氟沙星C36H28O16羥基-硝基三氟甲

左氧氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)C15H20O32-氟-甲

氯諾昔康C30H48O45-溴-6-甲氧基煙酸甲酯

氯諾昔康(標(biāo)準(zhǔn)品)C17H23NO3硝基鄰二甲酸二甲酯

洛沙坦/氯沙坦C16H12O45-氯-2,二氟甲酸

洛沙坦/氯沙坦C31H20O102-氯-5-甲氧基

馬賽替尼C2H8NO2P2,5-二氟酮
異尖線蟲屬探針法熒光PCR檢測試劑盒花生四酸12 - 脂氧合酶,12S型(Alox12/Alox12p)ELISA試劑盒CCRK  細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體100 ul

花生四酸(AA)ELISA試劑盒CD10/CALLA  CD10抗體100 ul

紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒CD105/Endoglin  CD105抗體1 lir

紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒CD117/c-kit/SCFR  干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體100 ul

橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒phospho-c-kit (Tyr936)  酸化原癌基因c-kit抗體100 ul

黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒Phospho-c-Kit (Tyr703)  酸化原癌基因c-kit抗體1 Kit

黑色素瘤ELISA試劑盒Phospho-c-Kit (Tyr719)  酸化原癌基因c-kit抗體100 ul

核轉(zhuǎn)錄因子kBP65(NFkBP65)ELISA試劑盒CD133 antigen  造血干細(xì)胞抗原CD133抗體100 ul

核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒CD137/TNFRSF9   CD137抗體100 ug

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 異尖線蟲屬 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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