微生物菌種的培養(yǎng): ⒈ 孢子制備 ⑴ 孢子的制備 一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。 ⑵ 霉菌孢子的制備 霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。 ⒉ 種子制備 ⑴ 搖瓶種子制備 搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。 產(chǎn)品名稱:創(chuàng)傷弧菌 貨號:YS-01J13481 拉丁文: Vibrio vulnificus 分離基物: 人的血液,佛羅里達,美國 提供形式: 凍干粉 安全等級: 1 模式菌株: yes 應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株 培養(yǎng)基: 2216E 生長條件: 37℃,好氧 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 創(chuàng)傷弧菌價格 | Vibrio vulnificus | YS-01J13481 |
公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明: 1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。 2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。 3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長 4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。 5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。 保存方法: 傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。 液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。 懸液保存法: ① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。 ② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。 載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。 常用的冷凍保存法: ① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。 ② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。 ③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。 微生物培養(yǎng)方法: 1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。 2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。 上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟: a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。 b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。 c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。 兔肝配蛋白A受體3 (EPHA3)2,7-二溴-9,9-二(6-溴己基)芴(>98.0%(HPLC))纖維蛋白溶酶原抗體 兔抗存活素抗體(Anti-Surv) 2-溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(GC))DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 兔糖磷脂酰肌(GPI) 4,7-雙(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊烷-2-基)-2,1,3-苯并噻二唑(>95.0%(GC))蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 兔白分化抗原CD99(CD99) 2,7-雙(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊環(huán)-2-基)-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))色素P450 1A2抗體 兔多形核白彈性蛋白酶(PMN Elastase)9,9-雙(4-溴苯基)芴(>98.0%(GC))磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 兔血紅素氧化酶1(HO1) 苯并環(huán)(>94.0%(GC))磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 兔凝血酶/抗凝血酶復(fù)合物(TAT)2,7-雙(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊環(huán)-2-基)芘(>97.0%(GC))磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 兔補體因子1R(Clr)2,7-二(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊環(huán)-2-基)-9,9-十二烷芴(>98.0%(HPLC))磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體 兔纖維連接蛋白(FN)3-溴三苯(>98.0%(GC))磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體 兔肺耐藥蛋白(LRP)4,4'-二溴八氟聯(lián)苯(>95.0%(GC))突觸后密度蛋白93抗體 兔粘蛋白3(MUC3)1,4-二溴-2,5-二氟苯(>98.0%(GC))磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 兔核孔蛋白62KDa(NUP62)4,4'-二溴三苯(>98.0%(GC)(T))磷酸化突觸后密度蛋白95抗體 兔成纖維生長因子結(jié)合蛋白2(FGFBP2)4,4'-二聯(lián)苯(>98.0%(GC))磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 兔β內(nèi)啡肽(β-EP) 1,4-二溴萘(>97.0%(GC))磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 兔酪氨酸蛋白激酶受體A2(EphA2)2,7-二溴芘(>97.0%(GC))樁蛋白Paxillin抗體 兔紅補體受體1 (CR1) 2,6-二溴蒽(>98.0%(HPLC))磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 創(chuàng)傷弧菌價格蕓薹鏈格孢(可訂)磷酸化蛋白激酶C抗體 謝氏酸桿菌磷酸化蛋白激酶C抗體 蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 嗜鹽棲鹽水芽孢桿菌磷酸化磷脂酰肌激酶催化亞單位A抗體 腸道致病性大腸埃希氏菌磷酸化磷脂酰肌激酶抗體 虎掌菌1號*磷酸化磷脂酰肌激酶抗體 德里腐霉磷酸化蛋白激酶C抗體 林芝假絲酵母磷酸化蛋白激酶C抗體
|