實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

己異戊酯  98%小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)免疫試劑盒芳硫酯酶A抗體Smad7/Smad6  Smad 7抗體

2-異-4-噻唑 98%小鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒擬南芥ACA11抗體SMAD5  信號轉導分子SMAD5抗體

異戊 98%小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒AHA3抗體（擬南芥）Smad4  Smad4抗體

吲哚 99%小鼠骨形成蛋白(BMPs)免疫試劑盒化鈉ATP酶蛋白a1抗體Smad3  信號轉導分子SMAD3抗體

吲哚 ≥99%, FCC, Kosher小鼠骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒化凋亡信號調節激酶1抗體Smad2  信號轉導分子Smad-2抗體

異丁酯 99%小鼠骨特異性堿性酶B(ALP-B)免疫試劑盒中性膽固酯水解酶1抗體Smad1  信號轉導分子Smad-1抗體

異丁香酚(正+反) 97%小鼠骨特性堿性酶C端肽免疫試劑盒人星形膠質抗體Smac/DIABLO  線粒體促凋亡蛋白抗體

乙酰異丁香酚 ≥98%, FCC小鼠骨特性堿性酶(BALP)免疫試劑盒縮酶A抗體SM22 Alpha  骨架相關蛋白抗體

乙異龍腦酯 90%小鼠骨橋素(OPN)免疫試劑盒膜粘連蛋白6抗體SM Myosin (Smooth Muscle)  人心肌肌凝蛋白(平滑肌) 小鼠單抗

乙位紫羅蘭酮 97%小鼠骨膠原交聯(Cr)免疫試劑盒β淀粉樣肽（25-35）抗體SLY  2型豬鏈球菌溶血素抗體

異紫羅蘭酮70 60-70%小鼠骨鈣素/骨谷氨蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒血管緊張素I抗體SLURP1/ANUP  抗腫瘤蛋白ANUP抗體

異戊酯  93%小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒腎上腺髓質素抗體(N端20肽)SLU7  SLU7蛋白抗體

異戊酯  mixture of isomers, ≥97%, FG小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒ADP核糖化因子結合蛋白2抗體SLTM  轉綠調節因子SLTM抗體

異戊酯 97%小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒精氨加壓素受體2抗體SLT/SLT-IIe/O139  豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體

2-丁異酯  Kosher, ≥98%小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒凋亡相關斑點樣蛋白ASC抗體SLPI/ALK1  分泌型白蛋白酶抑制因子抗體
谷草轉氨酶（GOT)烯酰輔酶A水合酶含結構域蛋白2抗體D-阿拉伯糖(標準品) Iron granules

腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體D-果糖（標準品） Iron(III) citrate

自身抗原EDC4抗體D-四氫藥根（標準品） DL-Lactic acid

E3泛素蛋白連接酶EDD抗體D-松（標準品） DL-Lactic acid

胚胎外胚層發育蛋白EED抗體DL-薄荷（標準品） Ammonium citrate, tribasic

轉錄接頭蛋白EP300抗體Euojaponine D CAS, Chrome azurol S

內皮脂肪酶抗體Eupeasaponin I Cytidine-5'-triphosphate (CTP), disodium salt

MYC啟動子結合蛋白1抗體Hederacolchiside A1(標準品) Cellulase

內質網蛋白29抗體Hederacolchiside E Pyronin Y

CD349抗體IL-17C/FITC  熒光素標記白介素-17C抗體IgG

FISH蛋白抗體IL-17D/IL-27/FITC  熒光素標記白介素-17D抗體IgG