熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
3,5-二甲酰氯(>99.0%(T))Aurora A/AIK Antibody2-溴-6-三氟甲基吡啶

2,二肼鹽酸鹽(>98.0%(HPLC)(T))Aurora B/AIM1 Antibody1-Boc-甲基-哌啶甲酸

O-硝基芐基羥鹽酸鹽(>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標記)Aurora B/AIM1 AntibodyBOC-D-氨酸

氮磺酰肼(>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標記)Phospho-c-Abl (Tyr89) (61A6) Rabbit mAb氟--5-甲

7-乙酰氧基-溴甲基(>98.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標)JMJD1B (C6D12) Rabbit mAb2-溴芐

Br-Mmc (=溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))IGFBP1 (D4E9T) XP® Rabbit mAbA,A二基Β苦基肼基游離基

溴甲基-7-甲氧基-1,并惡-2-酮(>98.0%(T))IGFBP1 (D4E9T) XP® Rabbit mAb無水檸檬酸單鈉鹽

DBD-PZ [=(N,N-二甲氨基磺酰基)-7-哌-2,1,并惡二唑](>98.0%(HPLC))Smad2/3 AntibodyN-甲基-氨基吡唑

溴甲基-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))Smad2 (L16D3) Mouse mAb2,6-二氨基嘌呤

 DBD-CO-Hz [=(N,N-二甲基氨基磺酰)-7-(N-肼基羰甲基-N-甲基)氨基-2,1,并惡二唑](>98.0%(HPLC))

Phospho-Smad2 (Ser245/250/255) Antibody溴-甲氧基

NBD-CO-Hz [=(N-肼羰甲基-N-甲氨基)-7-硝基-2,1,并惡二唑](>95.0%(HPLC))Di-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D85B4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)溴-甲氧基

DBD-ED [=(N,N-二甲氨基磺酰)-7-(2-氨基乙基氨基)-2,1,并惡二唑]PKM1/2 (C5E6) Rabbit mAb氟-2-甲氧基

AABD-SH (=乙酰氨基-7-巰基-2,1,并惡二唑](>94.0%(HPLC))Phospho-Smad2 (Ser465/467) (138D4) Rabbit mAbD-(+)-二對甲氧基甲酰

9-(溴甲基)丫啶(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-Smad2 (Ser465/467) (138D4) Rabbit mAb3,4,5-*氧基甲酸甲酯

DBD-COCl [=(N,N-二甲基氨磺酰)-7-(N-氯甲酰甲基-N-甲氨基)-2,1,并惡二唑](>98.0%(T))Phospho-Smad2 (Ser465/467) (138D4) Rabbit mAb3,5-二甲氧基

NBD-COCl [=(N-氯甲酰甲基-N-甲氨基)-7-硝基-2,1,并惡二唑](>92.0%(T))SimpleChIP® Human MRPL36 Promor Primers麥草畏

DBD-NCS [=(N,N-二甲基氨磺酰)-7-異硫酸基-2,1,并惡二唑]IFN-α (6B18) Mouse mAb2-噻吩乙酸

氯甲酸-9-芴甲酯(>97.0%(HPLC)(T))Phospho-VASP (Ser157) Antibody氯-2-基吡啶
偽結(jié)核棒桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒雞核因子κB受體活化因子(RANK)ELISA試劑盒PDK1/PDPK1  3酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體100 ul

雞核因子-κB(NF-κB)ELISA試劑盒Phospho-PDK1 (Ser241)  酸化3酸肌醇依賴性蛋白激酶1100 ul

雞過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA ELISA試劑盒Phospho-PDK1 (Tyr373/376)  酸化3酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體100 ul

雞過氧化物酶體增殖因子活化受體B(PPAR-B)ELISA試劑盒Pdk4  丙酮酸脫氫酶激酶4抗體20 ul

雞過氧化物酶體增殖因子活化受體A(PPAR-A)ELISA試劑盒PDX1  胰十二指腸同源異型盒基因抗體100 ul

雞過氧化氫酶ELISA試劑盒PEA3  瘤促活化因子3抗體100 ul

雞谷胱甘肽過氧化物酶8(GPX-8)ELISA試劑盒Pectinesrase  果膠酶抗體100 ul

雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)ELISA試劑盒PEA15  星形膠質(zhì)細胞PEA15抗體100 ul

雞睪酮(T)ELISA試劑盒Phospho-PEA15 (Ser104)  酸化星形膠質(zhì)細胞PEA15抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。