熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
二偶氮碳酰肼(>60%(HPLC))SignalSilence® RIP3 siRNA II (Mouse Specific)N,N'-二甲脒

二甲基黃S6 Ribosomal Proin (54D2) Mouse mAb (HRP Conjuga)2-氯代-2-甲基丁烷

砷試劑,DDTC銀鹽TPP1 (D4E2R) Rabbit mAb甲基酸芐基酯

2,6-二溴酚靛酚鈉HSD17B6 (D1T5H) Rabbit mAb5-氮雜吲哚-2-甲酸

鉻黑TUCP1 (D9D6X) Rabbit mAb2-溴酰氯

鉻藍黑RANT2/SLC25A5 (E2B9D) Rabbit mAb2-氯酰氯

鉻藍IMP2 (D4R2F) Rabbit mAb5,7-二氯-羥基-2-(三氟甲基)喹啉

乙二四乙酸三鹽(EDTA-3K)STAM2 Antibody甲氧基

熒光素(IND)Sec24C (D9M4N) Rabbit mAb2-乙基-甲氧基吡

熒光素(AR,90%)Phospho-ALK (Tyr1507) (D6F1V) Rabbit mAb2-氟-6-(二氟甲氧基)吡啶

試亞鐵靈Mono-Methyl Lysine [mme-K] MultiMab™ Rabbit mAb mix2,6-二氯-三氟甲基吡啶

鈣紅,乙二縮雙（鄰氨基酚）Tri-Methyl Lysine Motif [tme-K] (D1L1X) Rabbit mAb5-溴-2-甲氧基-硝基砒啶

羥基萘酚藍Dinitrophenol (D1D6) Rabbit mAb庚酸酯

試劑Digoxigenin (D8Q9J) Rabbit mAb溴芐

乙二四乙酸鋅二鈉 四水合物Na Channel β1 Subunit (D9T5B) Rabbit mAb2,二氯-

石蕊MRP1/ABCC1 (D7O8N) Rabbit mAb2-溴-三氟酚

甲基橙(IND)Na Channel β2 Subunit (D1S8E) Rabbit mAb氨基-2，2-二甲基-1-

甲基紅鈉鹽(IND)Sec24D (D9M7L) Rabbit mAb溴-2-氟三氟甲
肉芽腫鞘桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒HSP105  熱休克蛋白105抗體100 ul

膽固7α-羥化酶(CYP7A)ELISA試劑盒Syndecan-2  多配體蛋白聚糖2抗體100 ul

膽固(CH)ELISA試劑盒HtrA2/Omi  線粒體絲氨酸蛋白酶抗體100 ul

單絲氨酸蛋白激酶1(LIMK1)ELISA試劑盒TRT/RT  端粒酶抗體100 ul

單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒human serum  血清抗體100 ul

單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒Human serum  血清抗體100 ul

單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒COX10  細胞色素c氧化酶10抗體100 ul

單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒IAA (Indole-3-Acetic Acid)  吲哚乙酸抗體/植物生長素抗體100 ul

單純皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA試劑盒IAA  吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。