產(chǎn)品名稱:尖孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒植物病原 英文名稱:Fusarium oxysporumPCR() 編號:HE31011-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 硝酸銀/銀丹/硝酸銀(I)/Silver nitrate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% 包裝;1g 溴化銀/Silver bromide 質(zhì)量規(guī)格:719(202)是高等級凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂 包裝;250mg 碳酸銀/Silver carbonate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5% 包裝;1g 化銀/Silver iodide 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T) 包裝;5g 偏釩酸銀/礬酸銀/Silver metavanadate 質(zhì)量規(guī)格:Mesh 20-60 包裝;10MG 硫酸銀/Silver sulfate 質(zhì)量規(guī)格:粒徑0.49 - 0.69 mm 包裝;25g 鎢酸銀/Silver tungstate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于萜烯分析,≥99.5% (GC) 包裝;5g 乙酸銀/醋酸銀/Silver acetate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 氧化銀/氧化二銀/氧化銀(I)/Silver oxide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500g 金/金粉/金海綿/金海棉/Gold 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.7%(GC 包裝;100g 金絲/金/金海綿/金海棉/Gold 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 鋁鎳合金/鎳鋁合金/羅茲鎳合金/Aluminium-nickel 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% 包裝;5g 第威德合金/德瓦達(dá)合金/節(jié)瓦爾德合金/代伐達(dá)氏合金/銅鋅鋁合金/定氮合金/戴氏合金/第瓦爾德合金/Devarda's alloy 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 伍德合金/鉍鉛錫鎘合金/伍氏金/武德金/Wood’s metal 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 溴化金/三溴化金/ Gold tribromide 質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/ml 包裝;500g 氧化金/氧化高金/三氧化金/三氧化二金/氧化金(Ⅲ)/Gold oxide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,95% 包裝;1g 2,5-二苯惡唑/2,5-二苯基惡唑/2,5-二苯基噁唑/2,5-二苯基-1,3-氧氮雜茂/2,5-二苯基唑/PPO 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4% 包裝;1g 尖孢鐮刀菌PCR檢測試劑盒植物病原Methylophaga│aminisulfidivorans 中文名稱:噬甲基菌(加詞待譯)種屬:Methylophaga│aminisulfidivorans分離基物:樣/近海岸海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:M750生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96% Microbacterium│hatanonis 中文名稱:波多野氏微桿菌種屬:Microbacterium│hatanonis分離基物:其他/頭發(fā)定型劑提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:221生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96% Erythrobacter│gaetbuli 中文名稱:潮汐赤桿菌種屬:Erythrobacter│gaetbuli分離基物:樣/潮間帶海sea water of the tidal flat提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:,用于系統(tǒng)分類分析。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Streptomyces│violascens 中文名稱:淺紫鏈霉菌種屬:Streptomyces│violascens分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗菌/抗腫瘤活性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1003生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Brevibacillus│sp. 中文名稱:短芽胞桿菌種屬:Brevibacillus│sp.分離基物:土壤/油污海沙提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Chromohalobacter│salexigens 中文名稱:需鹽色鹽桿菌種屬:Chromohalobacter│salexigens分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Oceanicaulis│alexandrii 中文名稱:亞歷山大海洋柄菌種屬:Oceanicaulis│alexandrii分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Leifsonia│sp. 中文名稱:雷夫松氏細(xì)菌種屬:Leifsonia│sp.分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% |