實驗外包: 1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析 2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選 7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR 8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建 服務流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。 ? 產品名稱 | 芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒規格 ? | 英文名稱 | Bacillus spp.PCR | 貨號 | HE30676-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點優勢: 1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。 2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。 3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實用性:產品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。 PC4,SFRS1互動蛋白1試劑盒 質量規格:>97.5%,BC 包裝;5g P53抗體elisa試劑盒 質量規格:>98%,BR 包裝;100g P2蛋白抗體試劑盒 質量規格:BR 包裝;25g P2蛋白抗體試劑盒 質量規格:>98%,BS 包裝;25ml P27蛋白試劑盒 質量規格:>30%,Ind Grade 包裝;5ml P0蛋白抗體試劑盒 質量規格:分子生物學級 包裝;1g P0蛋白抗體試劑盒 質量規格:BR,UV>30% 包裝;1g OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體試劑盒 質量規格:BR 包裝;25g N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸試劑盒 質量規格:>98%,BR 包裝;5g N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶試劑盒 質量規格:分子生物學級 包裝;100mg N-甲基-D-天冬氨酸受體試劑盒 質量規格:38000~42000 mpa.s 包裝;500mg N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白試劑盒 質量規格:>99%,BR 包裝;1g N端中段骨鈣素試劑盒 質量規格:>99%,5N 包裝;5g N端前腦鈉素試劑盒 質量規格:Type I-S; from bovine submaxillary glands 包裝;250g NOD樣受體試劑盒 質量規格:>98%,EP 包裝;50g NET-1 elisa試劑盒 質量規格:>98%,BR 包裝;1g NADPH氧化酶3試劑盒 質量規格:>99.9%,BR 包裝;1g 芽孢桿菌通用PCR檢測試劑盒規格 Yersinia Pseudotuberculosis 中文名稱:假結核耶爾森氏菌種屬:Yersinia Pseudotuberculosis提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:營養肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:98% Yersinia enterocolitica 中文名稱:小腸結腸炎耶爾森氏菌種屬:Yersinia enterocolitica提供形式:凍干管,斜面培養物安全等級:2模式菌株:no培養方法培養基:營養肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:26-29℃,好氧存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。 純度:≥97% Brevundimonas diminuta 中文名稱:缺陷短波單胞菌種屬:Brevundimonas diminuta提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:營養肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:37℃,好氧 純度:98% Pediococcus acidilactici Lindner 中文名稱:乳酸片球菌種屬:Pediococcus acidilactici Lindner提供形式:凍干管,斜面培養物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:乳酸菌培養基: Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract () 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:30℃,好氧存儲條件:2-8℃冷藏 純度:98% Clostridium tyrobutyricum 中文名稱:酪丁酸梭菌種屬:Clostridium tyrobutyricum提供形式:凍干管,斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產丁酸培養方法培養基:生孢梭菌培養基:胰蛋白胨 10.0克 10.0克 葡萄糖 5.0克 氯化鈉 5.0克 酵母膏 3.0克 醋酸鈉 3.0克 可溶性淀粉 1.0克 半胱氨酸 0.5克 瓊脂 0.5克 pH6.8±0.2,蒸餾 1000ml 強化梭酸培養基:,FT傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:37℃,厭氧,存儲條件:2-8℃冷藏 純度:97% Bifidobacterium│longum 中文名稱:長雙歧桿菌種屬:Bifidobacterium│longum分離基物:健康嬰兒糞便提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食品發酵,原料預處理加工,抗膽汁鹽,抗胃酸,抗氧化;用于益生菌類食品。培養方法培養基:CM0787生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Staphylococcus albus Rosenbach 中文名稱:白色葡萄球菌種屬:Staphylococcus albus Rosenbach提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:營養肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH 7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4•H2O,則有利于產生芽孢。生長條件:37℃,好氧 純度:98% Listeriawelshimeri 中文名稱:威爾氏李斯特菌種屬:Listeriawelshimeri安全等級:1模式菌株:no應用領域:檢測用菌培養方法培養基:2生長條件:30℃ 純度:98% |