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溶組織內阿米巴探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-27
點擊次數:
755
產品特點:
溶組織內阿米巴探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
  50次溶組織內阿米巴探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

樣品RNA的抽提:
產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。

 產品名稱

溶組織內阿米巴探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Entamoeba histolytica

 貨號

 YSP96651

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術:
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環形凸起,兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
酚紅Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)甲基三丁基氯化銨

環貝特CD44 (156-3C11) Mouse mAb (Biotinylad)2-溴酰溴

曙紅Y(水溶)TCL1 Antibody2-溴吡

偶氮胭脂紅BBAP31 Antibody2-二環己基-2,4,6-三異基聯

偶氮胭脂紅GHEF1/NEDD9 (2G9) Mouse mAb2-二-叔丁膦基-2',4',6'-三異基聯

熒光桃紅B,酸性紅92GCN2 (E9H6C) Rabbit mAbBoc-L-beta-高脯氨酸

依萊鉻紅BWWOX Antibody奎尼丁

固紅RLWWOX Antibody基磺酰氯

固紅紫色LB鹽hnRNP A0 Antibody2-溴代異戊酸

莧菜紅ACSL1 Antibody(S)-(-)-2-甘氨

麗春紅4R,新胭脂紅,亮麗春紅5R,酸性紅18M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb5-氨基-2-溴嘧啶

酚藏花紅M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb2-芐基酸

天狼星玫紅,BBTHEX1 Antibody對甲氧基乙基酚

釕紅Tris-Glycine SDS Running Buffer (10X) 5-氨基-2-氟甲酸

藻紅B,四熒光素Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb沒有中文名

酸性紅88 Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb氟-2-

酸性紅183THEX1 (D2B4) Rabbit mAb(S)-羥基丁酸乙酯

酸性紅9PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-谷氨酰
溶組織內阿米巴探針法熒光PCR檢測試劑盒P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒TRA16  激素受體相關蛋白16抗體300 ul

P物質(SP)ELISA試劑盒TRA16   激素孤兒受體相關蛋白抗體100 ul

P53(P53)ELISA試劑盒TRADD  死亡區的腫瘤壞死因子受體1相關蛋白抗體20 ul

P27蛋白(P27)ELISA試劑盒TRAF1  腫瘤壞死因子受體相關因子1抗體100 ul

P21蛋白(P21)ELISA試劑盒TRAF2  腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體100 ul

P0蛋白抗體(IgG)ELISA試劑盒TRAF3/CD40bp  腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗體300 ul

P0蛋白(p0)ELISA試劑盒TRAF6  腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體100 ul

N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒TRAIL  腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體抗體20 ul

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒Transthyretin  轉甲狀腺素蛋白抗體100 ul

 

產品相關關鍵字: 溶組織內阿米巴 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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