實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

吡 98%豬角化生長因子(KGF)免疫試劑盒芳香烴受體抗體VDCC-L alpha/CCHL1A1  L-型電壓依賴型鈣通道α抗體

2,3,5-吡 99%豬降鈣素原(PCT)免疫試劑盒吸引素抗體VDAC3  線粒體外膜孔蛋白3抗體（電壓依賴陰離子通道蛋白3）

2,3,5-吡 ≥99%, FCC, Kosher, FG 豬降鈣素因相關肽(CGRP)免疫試劑盒腺苷三結合盒轉運體A1抗體VDAC  等電壓依賴性陰離子通道抗體

異戊乙酯 99%豬堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒蛋白激酶B2VCP  含纈酪肽蛋白抗體

異戊乙酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG豬狀腺素(T4)免疫試劑盒血管生成素2抗體VCAM-1/CD106/L1CAM  血管內皮粘附分子抗體

(±)-2--1-丁 98%豬低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒芳香化酶/色素P450/雌激素合成酶抗體VCAM-1  血管內皮粘附分子抗體

3,4-二氧 99%豬激素敏感性脂肪酶(HSL)免疫試劑盒腺苷A2A受體抗體VAV3  鳥嘌呤核苷交換因子VAV3抗體

2',6'二-3'-氟乙酮   97%豬激動異構酶/分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒蛋白激酶A錨定蛋白95抗體VAV2  癌因VAV2抗體

2,4-二-3-硝-5-氟  97%豬質衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒頂膜鈉依賴性膽鹽轉運體蛋白抗體VAV1  鳥苷轉換因子VAV1抗體

4-氟乙酮 98%豬質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒去整合素樣金屬蛋白酶8抗體VAT1L/KIAA1576  突觸小泡膜蛋白同源樣蛋白1抗體

對氟 98%豬質金屬蛋白酶9(MMP-9)免疫試劑盒芳香乙酰脫乙酰酶樣蛋白3抗體VAT  囊泡乙酰膽堿通道抗體

4'-乙酮 99%豬質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒ACN9蛋白抗體VASP  血管擴張激蛋白抗體

6-氧-2-乙酰萘 98%豬肌激酶同工酶MB(CK-MB)免疫試劑盒雙鏈RNA腺苷脫氨酶抗體（N端）VASH1  血管抑制蛋白1抗體

五化 CP，95.0%豬肌激酶(CK)免疫試劑盒腺苷單活化蛋白激酶α2抗體VAPB  囊泡相關膜蛋白相關的蛋白B

五化 AR，98.0豬肌紅蛋白(MB)免疫試劑盒腺苷激酶抗體VAPA  囊泡相關膜蛋白相關蛋白A抗體
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）脫羧酶蛋白體36 cxorf36抗原L-細辛脂素(標準品)Human, Mouse, Rat

(DTX1) (Deltex protein 1)抗原levatinHuman

DISC1 N端抗原Lup-20(29)-en-28-oic acid, ...Human, Mouse

DISC1 C端抗原Monnieriside GHuman, Mouse, Rat

DR3 死亡受體（抗原）MulticaulisinHuman, Mouse

人瘤病16型E7蛋白抗原N-阿魏酰真蛸Human, Mouse

表皮生長因子受體（抗原）N-芐-(9Z,12Z)-十八碳二烯酰Human, Mouse

天冬氨蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)（抗原）N-芐-(9Z,12Z,15Z)-十八碳三烯酰Human, Mouse

一種新型的胰島因子(抗原)N-芐十六烷酰Human, Rat

肽脯氨異構酶酶FKBP25抗體IFABP/FITC  熒光素標記小腸型脂肪結合蛋白抗體IgG

肽脯氨異構酶酶FKBP8抗體IFABP/FITC  熒光素標記小腸型脂肪結合蛋白抗體IgG