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豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

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更新日期:
2020-12-01
點(diǎn)擊次數(shù):
709
產(chǎn)品特點(diǎn):
豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒

英文名稱

 Porcine Circovirus(PCV)

貨號(hào)

 YSP97091

熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè),縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 花楸盤多毛孢 5g

P物質(zhì)(SP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% Pseudomonas koreensis Kwon et al.  1g

皮質(zhì)醇(Cortisol)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 蠟樣芽孢桿菌 500mg

尿調(diào)蛋白(UMOD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 巴斯德駒形氏酵母 5g

異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 巴西果小克銀漢霉 1g

N-酰神經(jīng)氨酰酸合酶(NANS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 根瘤菌 25g

4-羥基丙酮酸雙加氧酶(HPD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 綠毛殼擬毛梭孢變種 5g

甲腺原氨酸脫酶Ⅲ(DIO3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) >97.0%(GC) 枯草芽孢桿菌 1g

氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶溶酶體輔助蛋白2(ATP6AP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) >97.0%(GC) 費(fèi)爾氏酵母 5g

芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 釀酒酵母 1g

白細(xì)胞衍生趨化因子2(LECT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 大毛霉 100g

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白2(TNFαIP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 稻田彎曲嗜酸菌 25g

環(huán)腺苷二酸核糖水解酶(cADPRH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 朱黃籃狀菌 500g

Klothoβ蛋白(KLβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 膠孢 100g

脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅱ(P4Hα2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 小孢根霉須狀變種 25g

N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 假單胞菌屬 5g

骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥97% 新城疫病毒 25MG

70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 核盤菌 1g
豬圓環(huán)病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒鈣激活的中性蛋白酶2抗體N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1)  核受體輔助抑制因子(抗原)400 ul

CD45RO抗體Nestin  巢蛋白(神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白)(抗原)100 ul

嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗體AR Alpha1( Alpha1-adrenergic receptor)  α1腎上腺素能受體抗原20 ul

鈣整合素結(jié)合蛋白1抗體Nestin  巢蛋白(神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白)(抗原)100 ul

21號(hào)染色體開放閱讀框7抗體ASCL1/MASH1(Achae-scu homolog 1)  神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗原100 ul

酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體ASPP1(apoptosis stimulating proin of P53 1)  p53凋亡刺激蛋白1抗原100 ul

酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體ASPP2(apoptosis stimulating proin of P53 2)  P53凋亡刺激蛋白2抗原100 ul

酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體neurofasciu-155  神經(jīng)束蛋白-15520 ul

酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體NGF- Beta  神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β(多肽片斷抗原)100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 豬圓環(huán)病毒通用 探針法 熒光PCR檢測(cè)試劑盒
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