產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 產品名稱:漢扎洛瓦病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱:Hanzalova Virus RTPCR 編號:HE31059-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 氨基脲/氨基甲酰肼/氨脲/氨基甲秈肼/胺甲鹽肼/胺脲/半卡肼/Semicarbazide 包裝;100g 芥子酸/3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸/咖啡酸反式異構體/3,5-二甲氧基-4-羥基-反式-苯乙烯酸/3,5-二甲氧基-4-羥基苯酸/順13-二十二烯酸/順二十二碳-13-烯酸/3,5-二甲氧基-4-羥基桂皮酸/Sinapic acid 包裝;500g 苯磺酸鈉/Sodium benzenesulfonate 包裝;1g 癸酸鈉/Sodium decanoate 包裝;100g 鄰苯二甲酸氫鈉/苯二甲酸氫鈉/1,2-苯二羧酸單鈉鹽/鄰苯二甲酸鈉鹽/苯二甲酸氫鈉/酞酸氫鈉/Sodium hydrogen phthalate 包裝;25g 草氨酸鈉/Sodium oxamate 包裝;5g D-泛酸鈉/右旋泛酸鈉/(R)-N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)- β-丙氨酸單鈉鹽/D-本多生酸鈉/泛酸鈉/D(+)-泛酸鈉/Sodium D-pantothenate 包裝;1g 高酸鈉/過酸鈉/偏高酸鈉/Sodium periodate 包裝;5g 苯酸鈉/Sodium phenylpyruvate 包裝;1g 亞磷酸氫二鈉五合物/五亞磷酸鈉/Sodium phosphite dibasic pentahydrate 包裝;250mg 磷鉬酸鈉/鉬磷酸鈉/Sodium phosphomolybdate hydrate 包裝;5g 乙酸鍶/醋酸鍶/Strontium acetate 包裝;100g 氟化鍶/二氟化鍶/Strontium fluoride 包裝;25g 丁香醛/3,5-二甲氧基-4-羥基/Syringaldehyde 包裝;1g 丁香酸/4-羥基-3,5-二甲氧基苯甲酸/3,5-二甲氧基-4-羥基苯甲酸/4-羥基-3,5-二甲氧基甲酸/梧酸-3,5-二甲醚/紫丁香酸/Syringic acid 包裝;5g 牛磺去氧膽酸鈉/牛磺脫氧膽酸鈉/Sodium taurodeoxycholat 包裝;25g 4-甲苯磺酰氯/對甲苯磺酰氯/甲苯-4-磺酰氯/對氯化甲苯砜/PTSC 包裝;5g 漢扎洛瓦病毒PCR檢測試劑盒Psychrobacter│alimentarius 中文名稱:消化嗜冷桿菌種屬:Psychrobacter│alimentarius分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:無機污染物抗性菌/抗重金屬鉻(Cr)培養方法培養基:471生長條件:4℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Citricoccus│sp. 中文名稱:檸檬球菌種屬:Citricoccus│sp.分離基物:樣/海提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:大洋細菌培養方法培養基:471生長條件:4℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99% Planococcus│sp. 中文名稱:動性球菌種屬:Planococcus│sp.分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:大洋細菌培養方法培養基:471生長條件:4-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99% Salinibacterium│amurskyense 中文名稱:阿穆斯基灣鹽桿菌種屬:Salinibacterium│amurskyense分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:大洋細菌,產酶微生物/ 蛋白酶培養方法培養基:471生長條件:4-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Tenacibaculum│aiptasiae 中文名稱:海葵黏著桿菌種屬:Tenacibaculum│aiptasiae分離基物:生物樣/海葵(患病的)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:;培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Roseobacter│litoralis 中文名稱:海濱玫瑰桿菌種屬:Roseobacter│litoralis分離基物:不詳提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Oleispira│lenta 中文名稱:緩慢油螺旋菌種屬:Oleispira│lenta分離基物:樣/海提供形式:凍干物模式菌株:yes應用領域:模式菌株:;培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% Roseivivax│halotolerans 中文名稱:玫瑰色鮮艷菌(加詞待譯)種屬:Roseivivax│halotolerans分離基物:生物樣/附生植物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:;生物轉化微生物/含有細菌葉綠素;產酶微生物/產脲酶(Urease)培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98% 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |