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豬圓環病毒3型探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-15
點擊次數:
714
產品特點:
豬圓環病毒3型探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
  50次豬圓環病毒3型探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

樣品RNA的抽提:
產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。

 產品名稱

豬圓環病毒3型探針法熒光PCR檢測試劑盒

 英文名稱

 Porcine Circovirus 3 (PCV-3)

 貨號

 YSP97090

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術:
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環形凸起,兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
細胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 植物乳桿菌 250mg

天冬氨酸轉氨酶2(AST2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 炭球菌 5g

核氧化還原蛋白(NXN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 固氮假單胞菌 1g

視網膜劈裂蛋白(RS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 釀酒酵母 5g

膽固醇-25-羥化酶(CH25H)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 地衣芽孢桿菌 1g

胱硫醚β合酶(CβS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 糞產堿桿菌 1g

再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 大腸埃希氏菌(大腸桿菌)* 1g

MARCKS相關蛋白(MARCKSL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 芽胞桿菌 250mg

L1-細胞粘附分子(L1CAM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 格氏糖多孢菌 5g

唾液酸結合Ig樣凝集素10(SIGLEC10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 白僵菌 25g

二肽基肽酶9(DPP9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 枯草芽孢桿菌 5g

二肽基肽酶8(DPP8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ≥98% 釀酒酵母 5MG

囊泡酰膽堿轉運蛋白(VAChT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 96% 釀酒酵母 1g

核因子κB(NFκB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 96% 塔賓曲霉 250mg

分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 微黃大洋芽孢桿菌 1g

彈性蛋白酶2B(ELA2B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 戈登氏菌屬 5g

血管生成素1(ANGPT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 灰樹花2號 1g

血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶9(ADAMTS9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 馬賽菌 25g
豬圓環病毒3型探針法熒光PCR檢測試劑盒間隙連接蛋白26抗體M2-PK ( pyruva Kinase M2)  丙酮酸激酶-M2(抗原)100 ul

膜輔蛋白抗體M2-PK ( pyruva Kinase M2 )  丙酮酸激酶-M2(抗原)100 ul

F肌動蛋白α1亞基抗體p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810)  酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗原100 ul

CD8抗體Melan-A/MART-1  黑色素-A(抗原)100 ul

CD8抗體ARIP2a(Activin receptor 2A)  激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原100 ul

細胞表面趨化因子受體2抗體Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2)  β-抑制蛋白1/2抗原100 ul

胱抑素B/半胱氨酸蛋白酶抑制劑B抗體ARIP2B(Activin receptor 2B)  激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體100 ul

趨化素樣蛋白抗體MTR-1A (Melatonin receptor-1A)  褪黑素受體(抗原)100 ul

細胞角蛋白20抗體MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC  致癌基因(抗原)100 ul

 

產品相關關鍵字: 豬圓環病毒3型 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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