PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　香菇　25g

周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　明尼蘇達(dá)被毛孢　5g

層黏連蛋白α5(LAMα5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97%　武夷小單孢菌　100g

神經(jīng)調(diào)節(jié)素2(NRG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97%　北京芽孢桿菌　25g

水通道蛋白8(AQP8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥97%　米曲霉　5g

雙特異性酸酶9(DUSP9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥98%　類諾卡氏菌　5MG

神經(jīng)源性分化蛋白6(NEUROD6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥98%　毒蠅鵝膏菌　10MG

血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥96%　泡囊短波單胞菌　1g

血小板反應(yīng)蛋白2(THBS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥96%　大腸埃希氏菌　250mg

碳酸酐酶Ⅸ(CA9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　Indicator　Pseudarthrobacter　100g

白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　Indicator　弗雷德里克斯堡假單胞菌　25g

酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　Indicator　大腸桿菌　5g

精胺氧化酶(SMOX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　康氏木霉　100g

HtrA絲氨酸肽酶4(HTRA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　蒼白鹽八疊球菌　25g

阻抑素(PHB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　根瘤菌　5g

果糖二酸醛縮酶A(ALDOA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　Dye content,50%　熒光假單胞菌　50g

Ⅵ型膠原α1(COL6α1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　運動節(jié)桿菌　1g

果糖二酸醛縮酶B(ALDOB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　釀酒酵母　5g
脫氮副球菌探針法熒光PCR檢測試劑盒CREB調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體Goat human IgA  羊抗IgA          （親和層析純化）100 ul

軟骨相關(guān)蛋白CRTAP抗體Goat human IgG  羊抗IgG          （親和層析純化）100 ul

1號染色體開放閱讀框100抗體Goat human IgM  羊抗IgM          （親和層析純化）10 ug

1號染色體開放閱讀框104抗體Mouse human IgG  抗IgG        （親和層析純化）100 ul

1號染色體開放閱讀框112抗體Mouse human IgM  抗IgM        （親和層析純化）100 ul

1號染色體開放閱讀框113抗體Mouse Goat IgG  抗羊IgG        （親和層析純化）60 ul

1號染色體開放閱讀框114抗體Mouse goat IgM  抗羊IgM        （親和層析純化）300 ul

1號染色體開放閱讀框109抗體Mouse rabbit IgG  抗兔IgG        （親和層析純化）300 ul

CD93抗體Mouse Rabbit IgM  抗兔IgM        （親和層析純化）100 ul