產品名稱:乙酸激酶(ACK)活性試劑盒說明書 規格:48樣、96樣、 貨號:GOY-016617 檢測方法:紫外分光光度法、微板法 產品分類:呼吸代謝途徑系列 公司產品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質期:6個月 【實驗前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復 溶液+1份去離子水)用于樣本的復溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標儀450nm/630nm、旋轉蒸發儀/氮氣吹干裝 置、均質器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測定步驟: 1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點: ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 鴨疫里氏桿菌10倍酵母菌SD-URA培養基(半乳糖)豬促生長激釋放激(GHRH)試劑盒 橙色桿狀菌酵母菌SD-URA培養基(半乳糖+棉籽糖)豬促卵泡(FSH)試劑盒 褐球固氮菌*10倍酵母菌SD-URA培養基(半乳糖+棉籽糖)豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒 埃切畢赤酵母酵母菌SD-LEU/TRP/HIS培養基豬表皮生長因子(EGF)試劑盒 球孢白僵菌酵母菌SD-TRP/URA培養基豬白介8(IL-8/CXCL8)試劑盒 多分枝靈芝10倍酵母菌SD-TRP/URA培養基豬白介6(IL-6)試劑盒 植物乳桿菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培養基豬白介4(IL-4)試劑盒 美澳型核果褐腐病菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培養基豬白介3(IL-3)試劑盒 犁黑輪斑交鏈孢霉酵母菌SD-ADE培養基豬白介2(IL-2)試劑盒 季也蒙邁耶氏酵母酵母菌SD-ADE培養基豬白介1β (IL-1β)試劑盒 空腸彎曲桿菌酵母菌SD-TRP/HIS培養基豬白介18(IL-18)試劑盒 宇佐美曲霉酵母菌SD-TRP/HIS培養基豬白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 貝氏葡萄座腔菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE/LEU培養基豬白介10(IL-10)試劑盒 類產堿假單胞菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE/LEU培養基豬白介1(IL-1)試劑盒 釀酒酵母酵母菌*補充混合(CSM)培養基豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 居海綿溶桿菌酵母菌*補充混合(CSM-HOLLENBERG)培養基豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒 毛柄金錢菌(金針菇)酵母菌*補充混合(CSM-BRENT)培養基豬間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒 黃色孢鏈霉菌酵母菌*補充混合(CSM-HOPKINS)培養基豬間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒 總狀共頭霉酵母菌CSM-△LEU/△TRP培養基豬纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒 環圈鏈霉菌真菌格莫瑞六亞甲基四胺(Gomori's Methenamine Silver;GMS)銀染試劑盒豬纖溶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒 乙酸激酶(ACK)活性試劑盒說明書色氨-5-羥化檢測試劑盒單絲氨激1抗體 N-乙-5-羥色甲基轉移檢測試劑盒低分子量體7抗體 鹽還原檢測試劑盒促黃體生成抗體 蔗糖合成檢測試劑盒層粘α1抗體 番茄黑環病檢測試劑盒LETM1抗體 可溶性檢測試劑盒乳脫氫抗體 山梨脫氫檢測試劑盒化絲氨/蘇氨激抗體 麥胚凝集檢測試劑盒層粘連β1抗體 操作步驟: 實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。
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