產(chǎn)品名稱：幾丁質(zhì)酶試劑盒品牌

規(guī)格：24樣、48樣、

貨號(hào)：GOY-016524

檢測(cè)方法：可見分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類：碳水化合物代謝系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

腸炎沙門氏菌通用型魚濾過性毒菌敗血癥（Viral Haemorrhagic Septicaemia）信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)檢測(cè)試劑盒

大腸桿菌基因檢測(cè)試劑盒Toll樣受體2(TLR2)檢測(cè)試劑盒

弗氏志賀氏菌通用型魚傳染性造血壞疽病（Infectious Haematopoietic Necrosis；IHN）基因檢測(cè)試劑盒骨鈣(OC)檢測(cè)試劑盒

地衣芽胞桿菌通用型魚傳染性胰腺壞疽病（Infectious Pancreatic Necrosis；IPN）基因檢測(cè)試劑盒UDP葡萄糖葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)色鏈霉菌通用型鯉魚春季病毒血癥（Spring Viraemia of Carp；SVC）胰島(INS)檢測(cè)試劑盒

黃曲霉基因檢測(cè)試劑盒胱天7(CASP7)檢測(cè)試劑盒

蠟狀芽孢桿菌通用型魚氣單細(xì)胞菌屬（Aeromonas salmonicida）胱天7(CASP7)檢測(cè)試劑盒

尖孢鐮刀菌基因檢測(cè)試劑盒胱天7(CASP7)檢測(cè)試劑盒

假單胞菌屬通用型魚細(xì)菌性腎病（Bacterial Kidney Disease）基因檢測(cè)試劑盒激肽釋放4(KLK4)檢測(cè)試劑盒

異常威克漢姆酵母通用型魚傳染性胰腺壞疽病（Infectious Pancreatic Necrosis）激肽釋放4(KLK4)檢測(cè)試劑盒

馬勃基因檢測(cè)試劑盒激肽釋放4(KLK4)檢測(cè)試劑盒

伊氏副球菌通用型羊進(jìn)行性肺炎（Ovine progressive pneumonia）基質(zhì)金屬23B(MMP23B)檢測(cè)試劑盒

洋蔥伯克霍爾德氏菌基因檢測(cè)試劑盒髓觸發(fā)受體1(TREM1)檢測(cè)試劑盒

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）通用型羊布氏桿菌（Brucella abortus ）基因檢測(cè)試劑盒窖(CAV1)檢測(cè)試劑盒

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)通用型羊關(guān)節(jié)炎腦炎病毒（Arthritis Encephalitis Virus）Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測(cè)試劑盒

棱蓋多孔菌基因檢測(cè)試劑盒Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測(cè)試劑盒

梨黑斑鏈格孢通用型沙眼衣原體（Chlamydia）基因檢測(cè)試劑盒Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測(cè)試劑盒

樟疫霉通用型羊口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease；FMD）非元性烯化(NNE)檢測(cè)試劑盒

貝倫格勒座腔菌梨專化型基因檢測(cè)試劑盒肌肽(CAR)檢測(cè)試劑盒

釀酒酵母通用型羊約尼氏病/副結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium paratuberculosis /Johne’s disease）基因檢測(cè)試劑盒防御β2(DEFβ2)檢測(cè)試劑盒
幾丁質(zhì)酶試劑盒品牌腦鈉;腦鈉尿肽檢測(cè)試劑盒化絲裂原活化的激p38β抗體

腦源性營(yíng)養(yǎng)因子檢測(cè)試劑盒化自噬微管相關(guān)輕鏈3抗體

內(nèi)檢測(cè)試劑盒粘-5B抗體

內(nèi)皮檢測(cè)試劑盒粘-3抗體

內(nèi)皮1檢測(cè)試劑盒雞馬立克氏病火雞皰疹病抗體

內(nèi)皮型一氧化氮合檢測(cè)試劑盒多藥耐藥/P-糖抗體(C端)

內(nèi)皮脂肪檢測(cè)試劑盒抗體

內(nèi)源性分泌型糖基化終末產(chǎn)物受體檢測(cè)試劑盒黑色瘤相關(guān)抗原4抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。